本研究通过文献荟萃分析的方法重新认识心肺复苏后亚低温治疗的益处和可能带来的风险；探索一种新的、更理想的ROSC后亚低温治疗方法——腹腔降温法，研发一种腹腔灌流装置，通过该装置实现体温控制；建立一个可靠的兔心肺脑复苏模型并评价心肺复苏后腹腔降温法诱导亚低温的有效性和安全性。 第一部分对心肺复苏后亚低温治疗的重新认识——心肺复苏后亚低温治疗的Meta分析 目的： 根据现有临床研究评价心跳骤停，自主循环恢复后临床亚低温治疗的有效性和安全性。 方法： 外文文献从PUBMED数据库中检索，检索从1966-01-01～2008-08-18进行心肺复苏术并恢复自主循环的研究，国内文献主要从CNKI、万方数据库中检索，比较自主循环恢复后亚低温治疗和常温治疗的结果，并对文献结果进行Meta分析。 结果： 共9篇研究文献入选，院外心跳骤停自主循环恢复后亚低温治疗可提高病人的出院生存率、改善出院时神经功能和远期神经功能；和常温治疗组相比亚低温治疗可增加ROSC后病人的出血发生率，但总的不良事件发生率两组之间没有显著差异。有多种亚低温治疗方法，仍需探索理想的亚低温治疗方法。 结论： 院外心跳骤停自主循环恢复后亚低温治疗可提高出院生存率，改善出院时神经功能和远期神经功能，且副作用轻微，目前还缺乏理想的亚低温治疗方法。 第二部分腹腔灌注低温液体实现亚低温治疗的研究及低温液体腹腔灌流装置的研制 目的： 向兔腹膜腔内灌注低温液体能否实现快速诱导亚低温?诱导亚低温成功后通过腹腔灌注装置能否实现维持亚低温和缓慢复温？腹腔内灌注低温液体的安全性如何？ 方法： 以健康成年兔血浆主要电解质离子浓度、酸碱度、渗透压值为依据配制4℃的低温液体。15只健康成年新西兰大白兔依据灌注首剂4℃低温液体剂量的不同分为5组，剂量分别为30 ml/kg、40 ml/kg、60 ml/kg、80 ml/kg和100ml/kg。每10min记录一次鼓膜温度和腹腔内温度。选择鼓膜温度下降迅速、稳定的一组，在达到亚低温后连接腹腔灌流装置维持亚低温12h，随后进行复温。腹腔灌液前和灌液后4、8、12和24h后分别采静脉血检测血浆内主要电解质、阴离子间隙、二氧化碳结合力、红细胞比积和渗透压。实验结束后处死动物，取腹腔内主要脏器肝、小肠回盲部和肾组织，用3％的福尔马林固定，HE染色观察组织损伤情况。 结果： 兔腹腔内灌注低温液体后鼓膜温度迅速下降，30 ml组和40 ml组没有达到亚低温，60ml、80ml和100ml组均达到了亚低温，最低降至31.2℃。60ml和80ml组均达到了目标温度，没有出现过低温的情况，但80ml组动物的鼓膜温度下降更为迅速，平均30min左右达到了目标温度。因此80ml组动物在鼓膜温度达到目标温度后被选择来连接腹腔灌流装置，通过腹腔灌流装置能稳定维持亚低温和缓慢复温。80ml组动物在诱导低温阶段，腹腔内温度不到10min就达到了目标温度，而在维持亚低温阶段腹膜腔内温度始终低于鼓膜温度1-2℃。低温治疗后各时间点动物的主要电解质浓度、阴离子间隙、二氧化碳结合力、红细胞比积、渗透压和基础值相比没有出现明显的变化。低温24h后肝、肾和肠组织病理切片未见有组织损伤和炎症细胞浸润。 结论： 兔腹腔内灌注80ml/kg的4℃的低温液体能快速诱导亚低温，通过腹腔灌流装置能稳定维持亚低温和缓慢复温，并且这种降温方法能使腹腔内温度早于身体其它部位达到亚低温，甚至达到中度低温状态。腹腔内灌注低温液体后没有出现水、电解质和酸碱平衡的紊乱，病理切片也未见肝、肾和肠有组织损伤和炎症细胞浸润。 第三部分兔室颤心肺脑复苏模型的建立 目的： 建立一种简单、经济、有效的兔心肺脑复苏模型。 方法：共29只新西兰大白兔，其中27只采用经胸体表交流电诱发室颤的方法制作兔心跳骤停模型，依据CA时间的长短，随机分为CA8min、CA5min和CA3min组，每组9只，随后进行2min的胸外心肺复苏术，然后除颤直至自主循环恢复。ROSC后4h采血检测肌钙蛋白Ⅰ水平，CA前、ROSC后12h、24h、48h和72h分别采血测血浆NF—α水平。72h处死动物，取海马组织进行尼氏染色和TUNEL法原位细胞凋亡检测，计算每40×倍视野下海马CA1区尼氏染色阳性细胞数和凋亡细胞数，取心、海马、肠、肝和肾等主要脏器用RT—PCR法检测各组织内TNF—αmRNA水平。另取两只兔作为对照组，只进行外科操作不进行致颤和CPR。 结果： CA3min组兔ROSC后出现了严重的炎症反应，血浆TNF—α水平显著升高，肝组织内TNF—αmRNA水平显著高于其它组织。 结论： 本研究结果表明兔经历3min的CA后能存活较长时间，3min的CA和随后的CPR足以造成大量的神经细胞坏死和凋亡且出现了明显的全身炎症反应，肝脏可能是产生炎症因子TNF—α的重要要器官，该模型可能是一个比较理想的CPCR和复苏后综合症的研究模型。 第四部分心肺复苏后新型腹腔降温诱导亚低温的有效性和安全性评价 目的： 评价CPR后新型腹腔降温法诱导亚低温的安全性和有效性。 方法：48只新西兰大白兔随机分为常温治疗组、腹腔降温组、体表降温组和头部局部降温组，用3V、50HZ交流电经胸体表诱发室颤，随后进行CPR，ROSC后依据分组不同采用相应的温度控制方法，低温治疗组鼓膜温度达到目标温度后维持12h。室颤前和ROSC后12、24、48、72h分别采静脉血检测血浆主要生化指标和炎症因子TNF—a和IL—6水平。ROSC后72h处死动物分别取双侧海马组织，一侧用3％的福尔马林固定，切片，用NISSL、TUNEL法检测海马CA1区有活力和凋亡的神经元细胞，另一侧用WESTON BLOT法检测海马组织内TNF—a蛋白浓度；取肝脏组织，TUNEL法检测肝细胞凋亡率，用WESTON BLOT法检测肝组织内NF—Kbp65和NF—Kbp50蛋白浓度。 结果： (1)每组12只动物，所有动物均能成功诱发室颤，NT、PC、SC和LC组分别有9、10、9和10只动物复苏成功，复苏成功率各组间没有显著差异。但差异无统计学意义。(2)腹腔温度的变化，NT组维持在正常范围内，LC组略低于NT组维持在38℃左右，SC组维持在33-35℃之间，而PC组始终低于鼓膜温度1-2℃，维持在31-34℃之间，最低达到29℃。(3) ROSC后各组动物在各观察时间点上组间主要电解质、酸碱、水平衡和肾功能指标之间没有统计学差异。ROSC后各组动物均出现了明显的肝细胞损伤，血浆GPT、GOT水平迅速升高。ROSC后PC组各时间点血浆GPT、GOT水平明显低于其它各组，差异有统计学意义。(4) ROSC后血浆TNF—a和IL—6水平显著升高，从ROSC后的24h起PC组血浆TNF—a水平显著低于NT组，24h：P=0.020、48h：0.010、72h：0.014；ROSC后72h时也显著低于SC组和LC组；PC组血浆IL—6水平从ROSC后12h起就明显低于NT组，P值分别为0.013、0.03、0.010和0.009；其它降温组对ROSC后血浆IL—6水平的影响不明显。(5) ROSC后72hNT组海马CA1区有活力的神经元细胞数为37.07±6.43个/40x和LC组的35.13±6.97个/40×比较接近，均少于PC组的55.76±10.13个/40×和SC组的50.70±7.38个，对于海马CA1区神经元细胞的保护，PC组明显优于SC和LC组，PC：SC，p=0.043，PC：LC，p=0.000。ROSC后72h海马CA1区各组凋亡神经元细胞数分别为：NT组44.07±6.09个/40、PC组29.88±4.81个/40、SC组33.55±5.67个/40和LC组42.27±5.20个，和SC组相比，PC组凋亡细胞数减少更明显(PC：SC，P=0.026)，而LC组和NT组之间差异不明显。(6) ROSC后72h各组肝细胞凋亡百分率为：NT组3.66±1.28％，PC组1.87±0.58％，SC组2.98±1.35％和LC组3.72±1.41％。PC组明显低于其它各组，PC：NT，P=0.000；PC：SC，P=0.002；PC：LC，P=0.000，其它三组之间没有显著差异。(7) Western—Blot显示ROSC后72h各组海马组织内TNF—α蛋白浓度分别为：NT组1.04±0.03，PC组0.28±0.13，SC组0.55±0.03和LC组1.05±0.25。PC组显著低于其它各组：PC：NT，P=0.000；PC：SC，P=0.048；PC：LC，P=0.000。(8) ROSC后72h肝组织内核转录因子NF—kB明显激活，P65和P50蛋白浓度升高，PC组显著低于其它各组，而其它三组之间差异无统计学意义。 结论： ROSC后新型腹腔降温法能快速诱导亚低温，降温速度明显优于体表降温和头部局部降温；腹腔降温法对海马CA1区神经元的保护作用显著优于体表降温和头部局部降温；腹腔降温法还能快速降低腹腔内温度，能更好的减轻ROSC后的肝细胞损伤和肝脏内NF—kB的激活程度，从而降低ROSC后血浆TNF—a和IL—6水平。新型腹腔降温法有可能是ROSC后一种更理想的亚低温治疗方法。