[目的]研究表明,NF-κB与肿瘤的发生、发展及侵袭转移密切相关,一般认为NF-κB主要起抗凋亡和促肿瘤作用,因此NF-κB被作为治疗靶点,其抑制剂被用于癌症治疗。然而,数以千计的NF-κB抑制剂却未能发挥预期的临床效果。随着研究的深入,人们发现NF-κB不同位点的磷酸化状态可表现出截然相反的功能。国外已有研究表明,NF-κB Rel A/p65第536位丝氨酸位点磷酸化(p-p65 Ser536)对结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌有抑制作用。本课题对p-p65 Ser536在胃癌中的表达及作用进行研究。[方法]使用组织芯片结合免疫组织化学法(SP法)检测NF-κB p-p65 Ser536在正常胃粘膜、癌旁组织及胃癌中的表达,并分析其表达的临床意义;Western blot检测胃癌细胞和永生化胃粘膜上皮细胞中的表达情况;使用间接免疫荧光染色法检测NF-κB p65 Ser536的表达及观察其磷酸化入核情况;建立NF-κB p65第536位丝氨酸位点磷酸化与非磷酸化细胞模型,通过使用Transwell迁移、侵袭小室实验和划痕实验检测NF-κB p-p65 Ser536对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响。[结果]1.组织芯片的免疫组化结果显示:NF-κB p-p65 Ser536蛋白在胞浆胞核中均有表达,且在非胃癌组织中高表达,胃癌组织中的表达显著降低,两者阳性率分别为83.6%(107/128)和36.8%(71/193),差异有统计学意义(P<0.05)。此外,p-p65 Ser536在胃癌中的阳性表达率随着分化程度依次下降,差异具有统计学意义。NF-k B p-p65 Ser536的表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小无明显相关性,而与胃癌的病理分级、有无淋巴结转移及临床TNM分期相关(P<0.05)。2.Western-blot结果显示:胃癌MGC-803和SGC-7901细胞中NF-κB p-p65 Ser536蛋白表达水平较永生化胃粘膜上皮GES-1细胞显着下降(P<0.05),且低分化胃癌MGC-803细胞p-p65 Ser536的表达较中分化SGC-7901细胞明显减少(P<0.05)。3.免疫荧光结果显示:两种胃癌细胞中p65 Ser536磷酸化蛋白入核较永生化胃黏膜细胞明显减少。4.Transwell迁移、侵袭实验和划痕实验结果显示:NF-κB p-p65 Ser536对胃癌细胞的迁移、侵袭能力可能有抑制作用。[结论]1.NF-κB p-p65 Ser536蛋白在胃癌中的表达降低,其表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关。2.NF-κB p-p65 Ser536可能抑制胃癌细胞的迁移与侵袭能力。