【摘 要】
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1、本文通过重新设计引物，将SD序列添加至酵母耐铜基因CUPI编码序列前端，PCR扩增得到约200bp的CUPI片段，经测序证明扩增产物完全正确。将CUPI片段连于具有广泛宿主范围的柯斯质
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1、本文通过重新设计引物，将SD序列添加至酵母耐铜基因CUPI编码序列前端，PCR扩增得到约200bp的CUPI片段，经测序证明扩增产物完全正确。将CUPI片段连于具有广泛宿主范围的柯斯质粒pLAFR，上，得到重组质粒pLAFR3CUPI，经三亲结合转移至荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)AS1．1381细胞，得到重组菌株AS1．1381／pLAFR3CUPI。抗铜实验表明，AS1．1381／pLAFR~CUPI重组菌株的抗铜能力(6mM Cu2‘)高于AS1．1381／pLAFR，(4．5mM Cu2*)，重组菌株抗铜性得到提高。 2、根部定殖试验表明，无铜处理下，AS1．1381／pLAFR3CUPI和AS1．1381／pLAFR，在萝卜根部的定殖能力相同；不同部位的定殖数量为：根表〉根围土，不同接种方式相比，根表的定殖为：浸种方式〉土壤灌注，根围土中的定殖则为：土壤灌注〉浸种；接种30天内，根部的定殖数量随时间而缓慢下降；相同铜浓度下，AS1．1381／pLAFR3CUPI的根部定殖数量大于AS1．1381／pLAFR，，且可在更高的土壤铜浓度下定殖。 3、土壤中CuSO，处理浓度在1～7mmol／kg土时，AS1．1381／pLAFR3CUPI可减少萝卜植株对铜的吸收，缓解过量铜对萝卜生长的抑制；AS1．1381／pLAFR，则在土壤铜处理浓度为1～5mmol／kg土时才发挥作用；相同浓度铜处理下，AS1．1381／pLAF~CUPI缓解铜毒、促进生长的作用大于AS1．1381／pLAFR3。
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