小菜蛾Plutella xylostella(L.)作为一种世界性害虫主要危害十字花科植物。阿维菌素防治小菜蛾是一种重要的杀虫剂,但目前多数地区小菜蛾对阿维菌素产生抗药性威胁该药的继续使用。细胞色素P450在昆虫杀虫剂抗性中起到重要作用。本研究对小菜蛾种群进行阿维菌素抗性种群室内筛选、克隆了小菜蛾CYP340W1基因并进行序列特征分析、检测了小菜蛾CYP340W1基因在敏感和抗性种群,不同组织不同龄期的表达量、通过RNA干扰技术了解CYP340W1基因在小菜蛾对阿维菌素抗性中的作用。1.小菜蛾阿维菌素抗性种群室内筛选用阿维菌素处理过的甘蓝叶片饲喂小菜蛾,选出抗性种群,最终抗性种群(ABM-R)与敏感种群(ABM-S)相比抗性倍数达114.96倍。2.小菜蛾CYP340W1基因基因的克隆及序列分析克隆得到小菜蛾CYP340W1基因全长,该基因有1491bp编码区,5’-UTR(untranslated region)299-bp,3’-UTR 139bp,该基因编码496个氨基酸,分子质量为56.29 kDa,预测蛋白质等电点9.54。结构分析包含P450特征结构域C螺旋(WxxxR)、I螺旋(GxDTS)、K螺旋(ExxRxxP)、血红素结合位点(FxxGxxxCxG)。3.CYP340W1基因在小菜蛾不同组织不同龄期及不同种群中表达量分析该基因在小菜蛾的整个生命周期中均有表达,不同组织表达量分析显示头部表达量较高,可能与阿维菌素是神经性作用药剂有关。敏感和抗性种群比较该基因抗性种群中的表达量比敏感种群高4.46倍,呈显著性差异。4.RNA干扰验证CYP340W1基因的功能利用RNA干扰技术验证小菜蛾CYP340W1基因基因的功能,通过显微注射dsRNA沉默CYP340W1基因,发现该基因在干扰后6h开始下降,12h下降到最低,24h以后恢复。干扰后对阿维菌素的敏感性测定显示,实验组比对照组的死亡率显著升高。