第一部分sCD22在肾移植排斥反应患者血浆中的表达水平及临床意义目的：可溶性CD22(sCD22)是断裂的CD22分子胞外段,目前免疫相关疾病中关于sCD22的研究甚少。我们推测,B细胞活化导致CD22转化为“暴露态”可能是sCD22产生的机制,sCD22可能是B细胞活化的血清标志物；因此,移植排斥反应中血清sCD22水平很可能升高。为了研究sCD22与移植排斥反应的相关性,我们尝试了在肾移植受者的血清中检测sCD22。方法：我们采集了32例肾移植受者和15例健康志愿者的血清标本,将受试者分为三组：排斥组、功能稳定组和对照组。利用酶联免疫吸附法(ELISA),我们检测血清sCD22浓度,并分析其与临床资料的相关性。结果：我们发现,发生排斥反应的肾移植受者相较于肾功能稳定受者和健康人群具有更高的sCD22水平,sCD22>2.5ng/ml对于肾移植排斥反应具有一定的诊断意义(敏感性54.17%,特异性73.91%)。但是,sCD22对于肾移植排斥反应的诊断敏感性较低,仅能对部分排斥反应作出诊断,而一小部分肾功能稳定受者的sCD22水平也呈轻度升高状态。结论：我们在本实验中首次研究了肾移植受者血清sCD22的表达水平,初步证实了sCD22与移植排斥反应具有相关性,并有一定的诊断价值。为揭示sCD22这一新的炎症因子的临床意义和应用价值提供了新的研究方向,同时也为研究移植排斥反应提供了一个新的标志物。第二部分sCD22在脓毒症患者血清中的表达水平及临床意义目的：我们推测sCD22是B细胞活化的血清标志物,其在脓毒症患者血清中的表达水平可能升高。为了分析sCD22与脓毒症的相关性,并探讨其诊断意义,我们尝试在脓毒症患者血清中检测sCD22水平。方法：我们共采集血清样本104例,其中严重脓毒症患者14例,脓毒症患者24例,局限性感染患者25例,非感染性SIRS患者26例,健康志愿者15例。利用酶联免疫吸附法(ELISA),我们分别检测了血清sCD22、降钙素原(procalcitonin, PCT)和白介素6(interleukin-6, IL-6)浓度,分析其与临床资料的相关性,并比较这三种因子对脓毒症的诊断意义。结果：我们发现sCD22的血清浓度与革兰氏阴性细菌感染的严重程度具有明显的相关性,脓毒症患者的血清sCD22浓度高于非感染性SIRS和局限性感染患者,非感染性SIRS和局限性感染患者sCD22水平也高于健康人群,尤其在严重脓毒症患者,其血清sCD22水平更高。sCD22能够有效鉴别感染患者和非感染患者、全身性感染患者和局限性感染患者、以及脓毒症和非感染性SIRS患者,其诊断效力与PCT和IL-6相当。另外,sCD22与APACHE II评分的相关性高于PCT和IL-6。结论：sCD22是一种非特异性炎症因子,对革兰氏阴性细菌性脓毒症具有诊断意义,其诊断价值与PCT和IL-6相当,并且sCD22在预后评估方面可能比PCT和IL-6具有更高的应用价值。第三部分sCD22与B细胞活化相关性的实验研究目的：分别在体内和体外研究sCD22与B细胞活化以及B细胞表面CD22“暴露态”的相关性,探讨sCD22产生的机制,以及sCD22表达水平在B细胞活化相关疾病中的变化规律。方法：①体外实验：分别通过LPS刺激活化和唾液酸酶(sialidase)消化预处理,使B细胞表面CD22分子转化为暴露态,并通过ELISA法检测不同时间点细胞培养上清液中sCD22的浓度变化,并通过流式细胞术分析B细胞表面CD22的表达变化；②动物实验：分别通过腹腔注射LPS和盲肠结扎穿刺的方法构建小鼠脓毒症模型,检测血清sCD22水平和B细胞表面CD22的表达变化。结果：在体外实验中,我们发现唾液酸酶预处理B细胞能够在12小时内导致sCD22水平轻度升高,但不能维持sCD22的持续上升；而LPS刺激能够在24小时以后导致sCD22水平的持续性升高,并于大约72小时达到高峰。体内实验中,CLP脓毒症小鼠和LPS脓毒症小鼠血清sCD22水平均持续升高,但前者在发病12小时以内即开始上升,后者在12小时之后开始上升。另外,体内外B细胞活化均可导致B细胞表面CD22的表达水平上调。结论：sCD22与B细胞活化具有明显地相关性,可以作为B细胞活化的标志物。sCD22的产生是由于B细胞活化使细胞表面CD22的表达水平增加,同时使CD22转化为“暴露态”,增加了CD22分子胞外段的断裂几率,进而导致sCD22水平的升高。