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流行性感冒(Influenza)是一种由流感病毒侵染机体而引发的急性呼吸道传染病。已有研究证实,甲型流感病毒血凝素(HA)分子与流感病毒宿主细胞表面SAα2-3Gal或SAα2-6Gal糖链末端受体的结合,是流感病毒侵染机体的开始。不同流感病毒宿主细胞表面上的糖链受体结构是不同的,禽流感病毒血凝素(HA)主要识别和结合末端为SAα2-3Gal的糖链受体,而人流感病毒血凝素(HA)主要识别和结合末端为SAα2-6Gal的糖链受体。研究报道指出SAα2-6Gal糖链末端结构主要存在于人上呼吸道细胞表面,在人下呼吸道细胞表面仅有少量SAα2-3Gal糖链末端结构的存在。这些发现为抗流感病毒的相关研究提供了全新的思路,提示SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖链结构可以作为分离纯化血凝素,以及能够与血凝素竞争性结合该糖链受体糖结合蛋白的工具。本研究以此为思路,利用SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖链结构分别从健康人唾液和血清中分离及鉴定抗流感病毒保护性蛋白,并结合生物信息学研究手段对这些蛋白质的相关信息进行深入分析,寻找这些蛋白质与糖链SAα2-3Gal和SAα2-6Gal结合的结构域。主要参考本实验室已经建立的羟基化磁性微粒分离纯化糖结合蛋白的方法,利用SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖链修饰的功能化磁性微粒,从健康人唾液和血清中分别分离纯化糖链SAα2-3Gal和SAα2-6Gal结合蛋白(抗流感病毒保护性),并对这些蛋白质进行质谱鉴定；通过质谱数据分析唾液和血清中SAα2-3Gal和SAα2-6Gal结合蛋白的异同,为进一步研究人体内抗流感病毒保护性蛋白质在预防流感传播中的作用提供理论依据；最后利用motif-x基序分析模型,预测了特异性结合SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖链蛋白质的糖结合域。对获得的质谱数据进行整理、筛选、统计和分析,得到以下实验结果：1)从健康人唾液中共鉴定到116个SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖结合蛋白,其中94个SAα2-3Gal糖结合蛋白,83个SAα2-6Gal糖结合蛋白,与这两种糖链都结合的蛋白质有61个,与SAα2-3Gal糖链特异性结合蛋白质有33个,与SAα2-6Gal糖链特异性结合蛋白质有22个；两组唾液糖结合蛋白质的相对分子质量和等电点分布较为类似；由emPAI分析结果可知,Ratio Value(即mol%(SA2-6Gal):mol%(SAα2-3Gal)大于1.5的蛋白质有35个,小于0.66的蛋白质有9个；2)从健康人血清中共鉴定到144个SAα2-3Gal和SAα2-6Gal糖结合蛋白,其中117个SAα2-3Gal糖结合蛋白,115个SAα2-6Gal糖结合蛋白,与这两种糖链都结合的蛋白质有88个,与SAα2-3Gal糖链特异性结合蛋白质有29个,与SAa2-6Gal糖链特异性结合蛋白质有27个；两组血清糖结合蛋白的相对分子质量和等电点分布较为类似；由emPAI分析结果可知,Ratio Value(即mol%(SAα2-6Gal): mol%(SAα2-3Gal))大于1.5的蛋白质有52个,小于0.66的蛋白质有23个；3)统计分析可知,唾液和血清中与这两种糖链同时结合的蛋白质有13种,与SAα2-6Gal糖链同时结合的蛋白质仅有2种,分别为免疫球蛋白G-λ2链C区和免疫球蛋白G-κ链Ⅴ-Ⅳ区：与SAα2-3Gal糖链结合的蛋白质未出现重叠。根据motif-x基序分析可知,SAα2-3Gal糖链特异性结合蛋白质的糖结合潜在特征性糖结合域有44种,而SAα2-6Gal糖链特异性结合蛋白的糖结合潜在特征性糖结合域只有1种。