β-葡萄糖苷酶的应用价值随着纤维素为可再生资源的发展而受到国内外研究者的重视。β-葡萄糖苷酶属于纤维素酶系中的一种,广泛存在于植物、动物以及微生物中。它能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖。目前,p-葡萄糖苷酶的应用已经普遍扩展到生物酶法提取中草药有效成分物质中,尽量使其生产成本低,提取药品安全些。大量的研究结果表明,大豆异黄酮的生理活性主要来自异黄酮苷元的活性,而且人体容易吸收苷元型的异黄酮,将β-葡萄糖苷酶应用到水解大豆异黄酮中糖苷物质,以制备出富含大豆异黄酮苷元的保健食品,因此,利用生物酶法提取大豆异黄酮中含生物活性的苷元类物质具有十分重要的意义。近几年,国内外针对p-葡萄糖苷酶安全水解大豆异黄酮糖苷进行了大量深入的研究。本课题旨在掌握β-葡萄糖苷酶bgl的生化特性与催化特性,使其工业应用价值更高。本文以实验室自行制备的β-葡萄糖苷酶bgl为研究对象,经SDS-PAGE电泳分析,其分子量为77KDa。酶学性质结果表明：β-葡萄糖苷酶bgl的最适pH为3.5,最适温度为90℃；该酶有很高的热稳定性,在85～90℃保温2h酶活性不丧失,在95℃时的半衰期为50min。金属离子Co2+对p-葡萄糖苷酶bgl具有强烈的激活作用,金属离子Hg2+对p-葡萄糖苷酶bgl具有强烈的抑制作用；DMSO、甲醇和乙醇等有机溶剂对p-葡萄糖苷酶bgl都具有激活作用；β-葡萄糖苷酶bgl的底物特异性为pNPG。β-葡萄糖苷酶bgl动力学参数为pNPG的Km为1.34±0.09mmoL/L, Kcat/Km为47.67±1.72mmoL/L-1*s-1;纤维二糖的Km为0.52±0.04mmoL/L, Kcat/Km为1.97±0.02mmoL/L-1*s-1;水杨苷的Km为3.21±0.48mmoL/L, Kcat/Km为4.73±0.4mmoL/L-1*s-1。以纤维二糖为底物,在5-30%不同的DMSO浓度之间,对p-葡萄糖苷酶bgl没有影响,相比未加DMSO有机溶剂的酶活高些；在5-30%不同的[EMIm]Ac浓度之间,p-葡萄糖苷酶bgl酶活受到限制,随着其浓度增加,水解纤维二糖的作用逐渐减弱。实验结果表明p-葡萄糖苷酶bgl具有较好的酶学特性,极具工业应用价值。另外,本论文采用高效液相色谱法,对β-葡萄糖苷酶bgl在水解大豆异黄酮糖苷中的应用进行了研究,试验结果表明,在大豆提取物溶解在pH为3.5的广泛缓冲液体系中,酶解温度为90℃,酶解时间为1h,加酶量为80.68U的酶解条件下,测得大豆异黄酮水解率为96%,说明β-葡萄糖苷酶bgl对大豆异黄酮糖苷的水解效果显著。在大豆异黄酮醇提物溶解在pH为3.5的广泛缓冲液体系中,酶解温度为90℃,酶解时间为1h,加酶量为80.68U的酶解条件下,测得大豆异黄酮水解率为68%,说明p-葡萄糖苷酶bgl对大豆异黄酮醇提物的水解较好。