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研究背景:女性生殖系统恶性肿瘤中,上皮性卵巢癌发病率位居第三。由于卵巢癌缺乏明显的早期临床表现且临床上无特异敏感的早期诊断指标,研究表明临床上超过75%的卵巢癌患者在初诊时已达晚期,而卵巢癌晚期患者往往具有易复发性和药物耐受性,因此根据临床统计结果显示卵巢癌患者的五年生存率仅25%-50%。RNA结合蛋白是近年来研究发现的具有重要生物学功能的分子家族,其能通过调节基因的转录后表达水平影响细胞的生物学特性,参与人体许多生理病理进程,其中肿瘤的生物学进程是当今社会的研究重点和科研难点。QKI编码蛋白属于RNA结合蛋白,其能通过与m RNA上的QKI反应原件(QREs)结合从而影响m RNA的稳定及表达,调控RNA的转录和分布。研究表明,QKI-5的缺失或部分缺失能影响中枢神经系统的发育,且在肺癌,结直肠癌,口腔癌,胃癌,乳腺癌等癌症中QKI-5都存在明显的表达下调,相关体内体外实验结果也证实,QKI-5的表达下调与肿瘤的发生发展有重要的意义。Ezrin和SLC16A3分别作为重要的膜-细胞骨架蛋白和膜转运蛋白也在肿瘤的生物学进程中扮演重要的角色,研究表明SLC16A3和Ezrin在非小细胞肺癌(NSCLC)、导管内乳头状乳腺癌、前列腺癌和骨肉瘤等恶性肿瘤中存在明显的差异表达,Ezrin能通过改变细胞结构稳定性、调节细胞信号传导通路等途径参与肿瘤的发生发展而SLC16A3则通过调节细胞内的乳酸浓度影响肿瘤细胞的代谢水平最终影响其存活状态。然而,在卵巢癌中QKI-5、SLC16A3和Ezrin的相关性研究却很少,且缺乏相应的机制研究。研究方法:1、采用组织芯片技术检测QKI-5、Ezrin和SLC16A3在134例浆液性卵巢癌组织和18例正常的卵巢搔刮上皮细胞中的差异表达情况,并通过统计学方法分析各个基因表达趋势与临床病理的相关性。2、采用Q-PCR技术检测40例新鲜卵巢癌组织样品和27例正常卵巢上皮细胞中QKI-5、Ezrin和SLC16A3在m RNA水平的差异表达。。3、构建QKI-5和SLC16A3的过表达及敲低质粒,采用增殖、侵袭、迁移、周期以及凋亡实验检测其对A2780和SKOV3细胞功能的调节作用。通过药物敏感实验检测SLC16A3对卵巢癌细胞SKOV3和A2780铂类化疗药物耐药性的影响。4、通过裸鼠皮下成瘤实验和NOD/SCID鼠尾静脉转移实验分别检测QKI-5对卵巢癌细胞成瘤性以及血运转移能力的影响。研究结果:1、在134例卵巢癌病例调查中发现QKI-5和Ezrin的表达明显低于正常对照组,QKI-5和EZRIN的表达下调与卵巢癌患者的分期、大网膜转移情况、生存时间有重要的相关性(p<0.05)。而SLC16A3在卵巢癌中表达明显上调,且其表达上调的患者具有更强的化疗药物耐受性(p<0.05)。2、Q-PCR结果显示:与正常卵巢上皮相比,QKI-5和Ezrin在卵巢癌组织中呈下调表达,而SLC16A3则明显表达上调,且差异具有统计学意义。3、细胞实验结果显示:在SKOV3和A2780细胞中QKI-5能增加细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并能增加细胞G1期比例;动物实验结果显示:上调表达QKI-5能降低卵巢癌细胞系的成瘤能力并能减弱其血行转移能力。4、SLC16A3能增强卵巢癌细胞的增殖能力,并且能加强癌细胞穿过组织间隙和血管壁的能力,上调细胞S期比例,SLC16A3能通过增强SKOV3和A2780对铂类药物的耐药性,促进肿瘤的生长和抗凋亡能力。结论:1、QKI-5、Ezrin和SLC16A3在卵巢癌中存在异常表达,且具有显著的临床意义。2、QKI-5和SLC16A3在卵巢癌的生物学进程中分别发挥着肿瘤抑制和促进肿瘤发生发展的作用。3、QKI-5、SLC16A3和Ezrin有望成为卵巢癌早期诊断指标,并为卵巢癌患者预后判断及临床治疗提供新思路。