1-甲基乙内酰脲抑制INS-1细胞增殖及胰岛素分泌的研究

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目的:探索1-甲基乙内酰脲能否抑制大鼠胰岛素瘤INS-1细胞增殖及激素分泌的作用,探讨其可能的机制,并与生长抑素类似物奥曲肽进行比较方法:采取体外培养的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞株。分别用不同浓度的1-甲基乙内酰脲及奥曲肽处理72小时后,通过CCK-8实验检测各组细胞增殖抑制率,做出生长曲线图,并与空白对照组进行比较。FCM流式细胞仪检测各组细胞凋亡及细胞周期分布;放射免疫分析法测定各组细胞胰岛素分泌水平;Western Blot检测各组细胞内cAMP及PKA的表达。结果:1.CCK-8实验结果显示:不同浓度的1-甲基乙内酰脲以及奥曲肽处理细胞72h后,均能抑制大鼠胰岛素瘤INS-1细胞的增殖,并且抑制效果随着浓度的增大逐渐增强。2.FCM及细胞凋亡检测结果显示:相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲、奥曲肽各个浓度组的INS-1细胞凋亡率明显上升,差异有统计学意义(p<0.05);相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲、奥曲肽各个浓度组细胞处于G0/G1期的细胞比率均高于正常对照组。3.放射免疫分析测定结果显示:相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲及奥曲肽各实验组浓度下均能抑制INS-1细胞分泌胰岛素,且其抑制效果呈浓度依赖关系,随着浓度的增加,抑制效果增强。4.Western Blot检测结果显示:与空白对照组相比,1-甲基乙内酰脲及奥曲肽处理INS-1细胞后,其细胞内cAMP及PKA均明显下调,差异具有显著性(p<0.05).结论:1.1-甲基乙内酰脲对体外培养的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞具有抑制细胞增殖的作用,其机制可能与其诱导细胞凋亡及影响细胞周期有关。2.1-甲基乙内酰脲可以抑制INS-1细胞分泌胰岛素,其抑制激素分泌的作用具有剂量依赖性。1-甲基乙内酰脲抑制胰岛素分泌可能与其抑制了cAMP-PKA通路有关。
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