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背景研究发现肾脏炎症反应与种肾脏相关疾病,特别是慢性肾病及终末性肾病中,起着至关重要的作用。因此在肾脏疾病的治疗过程中,关注肾脏炎症的治疗,对防止或延缓终末期肾病的发展具有重大意义。在肾脏炎症中,NF-κB信号通路的激活可导致炎性细胞浸润、促炎因子的生成,从而造成肾组织损伤。TGR5是一种膜型胆汁酸受体,并属于G蛋白偶联受体家族,其主要生理作用是影响多种物质代谢,特别是脂质代谢。TGR5与多种代谢综合征相关,包括胰岛素抵抗、II型糖尿病、肥胖、血脂异常、脂肪肝等。越来越多的研究发现,胆汁酸受体除了可以影响代谢以外,还能与胆汁酸结合,引起下游的一系列生物学效应的产生,进而对机体在抗炎免疫、能量平衡和新陈代谢方面有着重要的作用。我们之前的研究发现,TGR5在肝细胞中可通过抑制NF-κB信号通路从而发挥其抑制炎症的作用。但目前尚无关于揭示TGR5与肾脏炎症的关系的研究。因此,我们以肾癌细胞系HEK293细胞为模型,并过表达TGR5后分析其在肾脏炎症中的作用,并且探索其作用机制。目的:TGR5在多种组织中具有抑制炎症的作用。本次研究通过体内外实验揭示TGR5与肾脏炎症的关系,并且探索其作用机理。方法:1、在肾癌细胞系HEK293细胞中,用TNF-α或P65诱导肾脏炎症,采用Real-Time PCR分析一些炎性因子在TGR5激活或未激活下的表达情况,分析TGR5激活后对炎症信号因子的表达的调控作用。2、在肾癌细胞系HEK293细胞中,转染NF-κB luciferase质粒,用TNF-α与P65诱导炎症反应。采用荧光素酶报告试验分析在TGR5激活或未激活时NF-ΚB信号通路的激活情况,从而证明TGR5对NF-ΚB信号通路的抑制作用。3、用TNF-α处理肾癌细胞系HEK293细胞,通过蛋白印迹实验,分析TGR5激活或未激活时P-IκB-α的表达情况,从而证明TGR5被激活时是否可以抑制IκB-α的磷酸化。4、用TNF-α处理肾癌细胞系HEK293细胞,提取核蛋白,通过WB分析TGR5激活或未激活时P65蛋白的核内转移情况。结果:1、在人肾癌细胞(HEK293)中,TNF-α与p65处理后,IL-1a、IL-1β、IP-10、MCP-1等炎症相关因子表达上调;但在TGR5被激活后这些上调的基因明显降低。2、在人肾癌细胞系(HEK293)中,导入NF-κB luciferase质粒,并用TNF-α与p65激活后,荧光素酶表达量升高明显;但在TGR5被激活后其表达量受到明显抑制。3、在经TNF-α处理的人肾癌细胞(HEK293)中,IκB-α蛋白的磷酸化明显升高,在TGR5被激活后IκB-α蛋白磷酸化的量降低。4、在经TNF-α处理的人肾癌细胞(HEK293)中,p65核内转移的量明显增多,然而在TGR5被激活后P65核内转移量明显降低。结论:胆汁酸受体TGR5在被其配体激活后,可抑制多种炎症相关信号因子的表达。并且,TGR5可以在肾脏细胞中抑制NB-κB信号通路。因此,TGR5的配体可能具有抗肾脏炎症的作用,将可作为肾脏炎症药物治疗的潜在靶点。