HIV-1 Tat协同HHV-6对HHV-8裂解周期复制的影响

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:errand2000
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本文旨在研究人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(human immunodificency virus 1,HIV-1)Tat蛋白协同人类疱疹病毒6型(human herpesvirus 6,HHV-6)对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)裂解周期复制的影响。本研究将HHV-6 U1102株感染的JJhan细胞与HHV-8潜伏感染的BCBL-1细胞进行细胞融合,采用RT-PCR和RealTime RT-PCR对HHV-8裂解周期基因ORF26的转录水平进行检测。结果显示,细胞融合后实验组ORF26转录水平高于对照组(t检验,P<0.05)。进而将HHV-6 U1102株感染的JJhan细胞与HHV-8潜伏感染的BCBL-1细胞进行混合共培养,并以HHV-6感染细胞培养上清作为条件培养基培养BCBL-1细胞,RealTime RT-PCR检测ORF26的转录水平和ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-10水平。结果显示,混合共培养中实验组ORF26的转录水平高于对照组(t检验,P<0.05)。灭活前后的HHV-6感染细胞培养上清培养BCBL-1细胞均能上调ORF26转录水平(t检验,P<0.05);混合共培养和条件培养基培养的实验组与对照组细胞培养上清中IL-10的表达水平没有差异(t检验,P>0.05),混合共培养的实验组细胞培养上清中IFN-γ水平高于对照组(t检验,P<0.05),但条件培养基培养的实验组与对照组细胞培养上清中IFN-γ水平没有差异(t检验,P>0.05)。56℃和紫外线灭活前后的纯化的HHV-6病毒颗粒感染BCBL-1后,分别在不同时间点开始出现高于对照组的ORF26转录。应用基因转染和Transwell共培养系统分别研究胞内和胞外表达的HIV-1 Tat蛋 南京医科人学硕_}学位论文白与HHV-6组合对ORF26转录水平的影响;评价胞内Tat对HHV-8复制的影响C结果显示,单纯细胞内外表达的Tat蛋白不能上调ORF26转录水平,但是胞内表达的Tat蛋白协同HHV~6感染可上调ORF26转录水平;胞外表达的HIV- 1 Tat与HHV~6组合不仅可显著促进ORF26 mRNA转录(t检验,P<0.05),而且可诱导HHv-8 KS.l蛋白的表达。上述研究结果表明,HHv-6病毒颗粒可诱导HH丫8裂解周期复制,Hlv- 1 Tat蛋白可协同HHv-6增强这种激活作用。提示HHv-6和Hl v-- ITat通过诱导KSHv复制导致病毒数量增加,进而参与KS致病机制。
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