【摘 要】
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β-葡聚糖作为现代化妆品的重要材料,常用于保湿抗皱。本课题主要以B16/HaCat为细胞模型,对双孢蘑菇β-葡聚糖的美白效果及若干作用机制进行研究。体外化学实验表明:通过自由
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β-葡聚糖作为现代化妆品的重要材料,常用于保湿抗皱。本课题主要以B16/HaCat为细胞模型,对双孢蘑菇β-葡聚糖的美白效果及若干作用机制进行研究。体外化学实验表明:通过自由基清除实验发现双孢蘑菇β-葡聚糖在一定的浓度范围内具有自由基清除效果但不显著,提示双孢蘑菇β-葡聚糖从抗氧化途径研究其美白作用意义不大;在对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制实验中,β-葡聚糖与熊果苷在同样的实验浓度范围内(0～100μg/ml)对蘑菇酪氨酸酶活性均有明显的抑制作用并与作用浓度呈现正相关。细胞实验表明:β-葡聚糖的作用浓度在0～2000μg/ml时对B16细胞增殖、形态和细胞周期均没有显著影响,而高浓度的熊果苷(100μg/ml)会产生明显的细胞毒性;实验得到β-葡聚糖作用时间48 h时,浓度为500μg/ml、2000μg/mlβ-葡聚糖对B16细胞内的酪氨酸酶活性抑制达到极显著水平(P<0.001)且明显优于熊果苷(100μg/ml)的抑制效果;同时发现β-葡聚糖可明显抑制8-MOP促B16细胞的黑色素合成;通过RT-PCR、Western Blot等方法发现,β-葡聚糖对Tyrosinase、TRP 1和TRP 2的m RNA转录水平均有下调但无显著差异,而蛋白质表达水平却具有显著的下调作用,结果揭示双孢蘑菇β-葡聚糖具有下调与B16细胞产生黑色素相关酶Tyrosinase、TRP 1和TRP 2的蛋白表达的效果,进一步解释了β-葡聚糖的美白机制。B16/HaCat细胞体外共培养实验显示:两种细胞的接种顺序对共培养细胞的生长没有明显影响;B16和HaCat细胞接种数量为1:4时共培养的两种细胞生长状态良好。在B16/HaCat细胞共培养模型上研究紫外照射影响以及β-葡聚糖的作用,结果发现β-葡聚糖和熊果苷对共培养细胞的酪氨酸酶活性和胞内黑色素含量均有一定的抑制作用;同时发现高浓度β-葡聚糖作用下的B16/HaCat细胞模型中,B16细胞黑色素含量比HaCat细胞多,而熊果苷对照组中却是HaCat细胞黑色素含量比B16细胞多,结果预见β-葡聚糖比熊果苷具有更明显抑制黑色素由B16细胞向HaCat细胞转运的作用。
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