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目的探讨RNA干扰重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)介导E2F-1基因沉默后对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP多药耐药性的影响及可能机制。方法将人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP接种于六孔板,分为3组：以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP,作为实验组；以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP,作为阴性对照组；空白对照组不做任何处理。转染后72小时,分别应用半定量RT-PCR和Western blot技术检测E2F-1mRNA及蛋白的表达；应用噻唑蓝(MTT)法分别检测各组细胞对阿霉素(ADR)、氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)的半数凋亡浓度(IC50)；应用流式细胞术检测转染后对各组细胞阿霉素泵出率的影响；应用流式细胞术检测转染后对各组细胞周期分布及凋亡率的影响。应用半定量RT-PCR和Western blot技术进一步检测各组细胞中经典多药耐药相关基因MDR1、 MRP及凋亡相关基因Bcl-2,Bax, Survivin, CyclinD1, c-Myc, Skp2的mRNA及蛋白表达水平。结果与阴性对照组、空白对照组相比,实验组E2F-1mRNA表达水平较阴性对照组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%,蛋白表达水平分别下降66.7%和70.5%,差别均有统计学意义(均P<0.05)；实验组对阿霉素、氟尿嘧啶和顺铂的化疗敏感性较其他两组均显著提高(均P<0.05),阿霉素泵出率明显降低[(0.16±0.01)%vs.(0.37±0.01)%vs.(0.35±0.02)%,P<0.05],凋亡率明显提高[(33.82-4-1.26)%vs.(17.34-4-0.81)%vs.(13.16±1.06)%,P<0.05]；半定量RT-PCR和Western blot结果显示：与阴性对照组、空白对照组相比,实验组MDR1、MRP、Bcl-2、Survivin、CyclinD1、 c-Myc及Skp2的mRNA及蛋白表达水平均显著降低,差别均有统计学意义(均P<0.05)；实验组Bax mRNA及蛋白表达水平与阴性对照组和空白对照组比较,差别均无统计学意义(P>0.05)；阴性对照组与空白对照组比较,上述指标差别均无统计学意义(均P>0.05)。结论Lv-shRNA-E2F-1可明显抑制胃癌细胞E2F-1mRNA及蛋白的表达,有效增加胃癌耐药细胞对顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶等化疗药物的敏感性,降低其对阿霉素的泵出率,使细胞周期阻滞于G0/G1期,凋亡率明显提高,并显著下调多药耐药相关基因MDR1及MRP的表达,明显抑制了凋亡相关基因Bcl-2、Survivin、CyclinD1、c-Myc及Skp2的表达,进而显著下调Bcl-2/Bax比率,最终逆转胃癌耐药细胞多药耐药性。提示E2F-1有望成为胃癌化疗的新靶点。