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中药复方成分复杂,作用广泛,研究中药复方在体内的药代动力学特征有助于指导临床用药,制定合理的给药方案等。黄连解毒汤在传统中医药两千年的临床上应用非常丰富,涉及多种疾病,对于脑缺血的治疗运用尤为广泛,临床研究背景成熟。本论文以黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏、黄连-栀子为研究对象,进行其在脑缺血大鼠体内的药代动力学比较研究,并辅以抗氧化自由基药效学研究,为临床上黄连解毒汤治疗脑缺血相关性疾病的合理用药提供指导。目的:比较研究黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子在脑缺血大鼠体内的药代动力学过程,探讨药物在复方中的作用;对黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子中的指标成分进行分类整合,探讨黄连解毒汤中药物之间的相互作用;对黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子中的指标成分进行综合整合,进行各组药物抗自由基氧化药效学研究,建立浓度-时间-效应曲线,初步以药效结果验证药代动力学结果。内容:1.黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子水提液体系体外含量的对比研究;2.比较研究黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-桅子中主要成分在脑缺血大鼠药代动力学特征,同时进行灌胃给药后,脑缺血和正常状态下大鼠的药代动力学特征比较;3.对黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子中的成分进行分类整合比较研究;4.采集黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-桅子在脑缺血大鼠体内的抗自由基氧化药效学数据,结合药物在脑缺血大鼠体内全部指标的整合药动学,建立血药浓度-时间-效应曲线。方法:1.制备黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子水提物干燥粉末,线栓法制备大鼠脑缺血模型,给药后在规定的不同时间点取血。2.建立血浆中桅子酸、栀子苷、黄芩苷、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩素的含量HPLC检测方法;考察病理状态和正常状态下不同组别药物主要成分的药代动力学的影响规律;3.采用曲线下面积自定义权重系数的方法对黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子中成分环烯醚萜类、黄酮类、生物碱类分类整合,研究药物在黄连解毒汤全方中的作用,以及药物之间的相互影响;4.进行抗自由基氧化药效动力学研究,测定不同时间点血浆SOD、MDA值;结合黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子全部指标成分的整合药动学,建立血药浓度-时间-效应曲线;比较不同组别药物的药代动力学特征并加以药效学初步验证。结果与结论:在体外含量测定研究中发现,黄连-栀子组的栀子酸、栀子苷含量分别为1.948、11.478 mg/g比全方中的含量2.188、13.322 mg/g低;黄连-黄芩组的黄芩苷、黄芩素的含量分别为13.677、1.400 mg/g比全方中的含量17.514,1.945 mg/g低;黄连-黄柏组中的黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量分别为1.498、1.288、8.586 mg/g比在全方中含量3.646、3.773、22.681 mg/g,黄连-黄芩中含量 2.645、2.716、10.506 mg/g,黄连-栀子中含量 2.965、3.201、17.984 mg/g均低。体内药代动力学研究结果:1)灌胃给药后,相对于正常组,脑缺血大鼠对于各主要成分的吸收均比较好,表现在达峰时间短,达峰浓度大等药动学参数上;2)将黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子中主要成分按大类整合后发现,黄连-黄芩和黄连解毒汤的黄酮类整合药时曲线相似度高,药动参数相近,黄连-黄芩的药动参数AUC(0-t)、AUC(0-∞)、Tmax、Cmax 分别为 39.06 mg/L*h、45.47mg/L*h、0.63 h、2.26 mg/L,黄连解毒汤的药动参数 AUC(0-t)、AUC(0-∞)Tmax、Cmax分别为 47.09 mg/L*h、53.26 mg/L*h、0.5 h、3.65 mg/L;黄连-栀子和黄连解毒汤的环烯醚萜类整合药时曲线相似度高,药动学参数相近,黄连-栀子的药动学参数AUC(0-t)、AUC(0-∞)、Tmax、Cmax分别为85.67 mg/L*h、127.66 mg/L*h、0.54 h、8.21 mg/L,黄连解毒汤的药动参数 AUC(0-t)、AUC(0-∞)、Tmax、Cmax分别为 145.46 mg/L*h、217.03 mg/L*h、0.417 h、10.17 mg/L;而生物碱类成分整合后,黄连-黄芩,黄连-黄柏,黄连-栀子无论药时曲线和药动参数均与黄连解毒汤全方相去甚远。抗自由基氧化药效动力学研究结果,脑缺血造成大鼠体内发生缺氧损伤,灌胃给药后,各组大鼠72h内SOD含量上升、MDA水平显著降低,表明黄连解毒汤、黄连-黄芩、黄连-黄柏、黄连-栀子均能够改善由于缺血损伤引起的缺氧抵抗,黄连解毒汤全方对SOD含量的回升以及MDA水平的降低的效果最好,黄连-栀子组次之;将黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子全部指标成分进行药动学整合,结合药效动力学结果后,SOD曲线图显示出来的一定的量效关系,MDA曲线图显示出来的量效关系不大。本实验对黄连解毒汤和组方药对黄连-黄芩、黄连-黄柏,黄连-栀子进行整合药动学及药效学相关性初步研究。实验加以初步的药效学验证各组药物的多效应指标成分的整合药动学,为指导黄连解毒汤临床合理用药,制定合理的给药方案奠定基础。