核因子-KappaB在大鼠放射性心脏损伤中的表达

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前言   放射治疗作为恶性肿瘤三大治疗方法之一,在恶性肿瘤,尤其是胸部恶性肿瘤的现代治疗中得到广泛的应用。而在接受放射治疗的过程中,与胸部肿瘤毗邻的心脏不可避免地会受到不同程度的照射,从而引起包括急慢性心包疾病,心肌病,瓣膜功能不全,传导异常以及冠状动脉疾病在内的放射性心脏损伤(radiation-induced heart disease,RIHD)。随着肿瘤患者生存期的延长,迟发性心脏损伤问题日益突出。对于放射性心脏损伤的形成机制及预防、治疗进行相关研究,显得十分必要。核因子kappaB(nuclear factor-kappaB,NF-kappaB)是一种控制编码细胞因子、生长因子、细胞黏附分子、化学激活物、健康和各种疾病状态一些急性期蛋白基因表达的普遍存在的转录因子。它参与了多种炎症细胞因子、趋化因子和促纤维因子的合成,细胞增殖、细胞外基质交联及成纤维细胞的分化过程。目前多项研究发现,NF-kappaB与多种类型的心脏损伤相关,NF-kappaB的适当阻滞有益于改善心脏功能,但是在放射性心脏损伤中NF-kappaB的表达在国内外相关研究较少,故本实验通过以大鼠为研究对象,探讨NF-kappaB在放射性心脏损伤中的表达情况。   材料与方法:   一、材料   共40只SD大鼠,随机将大鼠分为3组,1组不接受任何干预,其余2组分别用6Mv高能X射线照射心脏,剂量分别为15Gy和20Gy。照射后饲养3个月后,以水合氯醛过量麻醉法处死大鼠,取其心脏组织。将心脏组织横断,一部分固定于4%的中性甲醛溶液中,一部分放置于-80℃冰箱中储存备用。   二、主要试剂和来源   NF-kappaB多克隆抗体,购自美国Santa Cruze公司。其余免疫组化试剂盒,购自北京中杉金桥生物技术有限公司。   三、方法   以Sprague-Dawley大鼠为研究对象,处理组接受X射线照射(照射15Gy组、照射20Gy组),对照组不接受X射线照射,3个月后以免疫组织化学方法测定NF-kappaB在放射性心脏疾病中的表达,采用计算机图像分析系统对免疫组化染色定量测定,统计数据以均数±标准差表示,以SPSS17.0软件分析,组间比较用ANOVA分析,正态资料组间用LSDt检验,方差不齐用秩转换的非参数检验,P<0.05有统计学意义。   结果:   非照射组NF-kappaB有少量表达,照射15Gy组、照射20Gy组的NF-kappaB表达均增强。与非照射组比较,照射15Gy组、照射20Gy组NF-kappaB表达均有统计学差异,P值分别是0.005、<0.001;但两照射组之间比较有统计学差异,P=0.035。   结论:   1、NF-kappaB是导致急性放射性心脏疾病的重要因素,照射剂量越大,其表达越显著,其与放射性心脏疾病的关系越密切。在放射性心脏疾病的形成中扮演着十分重要的病理生理作用。   2、NF-kappaB在急性放射性心脏疾病中的表达,两照射组之间比较有统计学差异(P<0.05),但本实验的样本数(12只、10只)较少,观察时间较短,结论仍需要进一步研究和论证。
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