有毒赤潮藻的爆发会造成海洋生态受到破坏,影响海洋渔业的发展,甚至造成海产品中毒等公共卫生事件。塔玛亚历山大藻和利玛原甲藻是麻痹性贝毒和腹泻性贝毒的主要产毒藻种。麻痹性贝毒和腹泻性贝毒曾引起多起海产品中毒事件。由于麻痹性贝毒和腹泻性贝毒化学结构复杂,无法通过化学合成方式获得,因此,探究塔玛亚历山大藻和利玛原甲藻的生长产毒条件,制备麻痹性贝毒和腹泻性贝毒基体标准物质具有重要意义。首先,以塔玛亚历山大藻和利玛原甲藻为对象,在实验室条件下进行培养。探究在不同氮磷浓度两种产毒藻生长的影响,对其生长过程进行跟踪,绘制生长曲线。提取藻毒素,利用LC-MS/MS对藻毒素成分及含量进行分析检测。实验结果可以为有毒赤潮预警提供预警诊断指标,以及为在实验室条件下养殖塔玛亚历山大藻和利玛原甲藻提供借鉴。结果发现:在氮浓度为80μmol/L、磷浓度为4.2μmol/L时,生长条件较为适宜;氮富集和磷限制都会促进塔玛亚历山大藻产毒,可能是由于氮磷比失衡造成;氮限制会促进利玛原甲藻产毒,而磷浓度对产毒影响不大。其次,针对麻痹性贝毒和腹泻性贝毒共14种贝类毒素,优化了液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析检测方法。麻痹性贝毒包括石房蛤毒素(STX)、膝沟藻毒素-1&4(GTX1&4)、新石房蛤毒素(NEO)、膝沟藻毒素-5&6(GTX5&6)、N-磺酰胺甲酰基类毒素-1&2(C1&2)、脱氨甲酰基膝沟藻毒素-2&3(dcGTX2&3)、脱氨甲酰基石房蛤毒素(dcSTX)和大田软海绵酸(OA)、鳍藻毒素-1&2(DTX1&2)。检测方法的建立和优化不仅为藻中毒素成分含量检测提供了依据,也为基质标准物质的检测提供了保障。然后,分别以本实验室培养的塔玛亚历山大藻和利玛原甲藻为饵料喂食扇贝。对扇贝贝肉进行匀浆,通过LC-MS/MS进行检测分析贝类毒素在贝类体内的积累量以及毒素种类,研究了贝类毒素在扇贝体内累积转化过程,并对其进行了健康风险评估。研究发现:内脏部位是贝类毒素累积的主要部位;喂食低毒性的塔玛亚历山大藻到第七天,喂食利玛原甲藻到第四天,贝类体内毒素超过安全限量值。最终,通过藻贝共生,使贝类染毒。将染毒的贝肉匀浆,做成冻干粉状基体标准物质,并对其进行均匀性和稳定性检验。检验结果显示,本实验制备的两种基体标准物质均匀性和稳定性良好。本实验证明了在实验室条件下使贝类自然染毒并制成基体标准物质具有可行性,为今后麻痹性贝毒和腹泻性贝毒相关毒素的国家二级标准品的申请提供基础。