绿原酸、咖啡酸、阿魏酸干预补体旁路激活致内皮细胞炎症反应的研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:song198143
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目的:研究绿原酸及其代谢产物咖啡酸和阿魏酸对补体旁路激活导致人微血管内皮细胞炎症反应中相关粘附分子表达的干预作用。方法:采用眼镜蛇毒因子(CVF)激活血清补体旁路,激活产物作用于人微血管内皮细胞,分别取多个时间点细胞培养上清,采用ELISA方法检测ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量,MTT法筛选多个不同浓度的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对内皮细胞活力的影响,以确定合适的实验浓度,采用对细胞活力无影响的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸浓度预处理内皮细胞,检测细胞培养上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量,对细胞活力有影响的浓度,进一步研究对内皮细胞的损伤情况。结果:补体旁路途径的激活物作用于微血管内皮细胞后,导致内皮细胞活化,引起细胞上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的浓度上调。0.1、0.5 mmol·L-1的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对细胞活力没有影响,1.0、3.0、5.0 mmol·L-1绿原酸、咖啡酸、阿魏酸组对细胞活力有明显的抑制作用。50、100、250μmol·L-1的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸可下调ICAM-1、IL-6、IL-8的表达。而大于1.0 mmol·L-1绿原酸、咖啡酸、阿魏酸可导致细胞形态明显改变,细胞收缩,间隙变大,LDH释放在24 h时间点明显增加,各实验组的凋亡细胞比例明显升高。结论:50、100、250μmol·L-1的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对炎症反应有干预作用。而大于1.0 mmol·L-1的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸可以造成内皮细胞损伤,引起内皮细胞凋亡。
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