氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞HGC-1表达的影响及调控机制研究

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目的:观察中药苦参提取物氧化苦参碱(Oxymatrine,OM)对人胃癌SGC-7901细胞人粒细胞集落刺激因子-1(HGC-1)表达的影响,并研究OM是否通过NF-κB信号通路调控体外培养的人胃癌SGC-7901细胞HGC-1表达。探讨氧化苦参碱抗肿瘤的作用机制,为应用于临床肿瘤的治疗提供部分理论基础。方法:用培养的人胃癌SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育培养48h,采用逆转录PCR(RT-PCR)检测氧化苦参碱对SGC-7901细胞HGC-1基因转录的影响;Western blot检测氧化苦参碱对SGC-7901细胞HGC-1蛋白表达的影响;并裂解SGC-7901细胞提取核蛋白检测p65的核转位情况;此外,为探讨NF-κB与HGC-1基因表达的关系,在SGC-7901细胞与氧化苦参碱共培养时,加入25μM NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)共孵育后,并行RT-PCR检测其对HGC-1基因转录的影响。结果:(1)SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后,RT-PCR结果显示,HGC-1基因mRNA水平明显降低(p<0.05),而对照组表达水平无明显变化(p>0.05)。(2)SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后,Western blot结果显示,HGC-1表达明显减弱(p<0.05),而对照组表达水平无明显变化(p>0.05)。(3)SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后即可检测出p65蛋白转移至核内减少,表明氧化苦参碱与SGC-7901细胞共孵育后能抑制NF-κB活性。NF-κB特异性抑制剂PDTC能进一步促进氧化苦参碱下调HGC-1基因表达。结论:(1)氧化苦参碱能下调SGC-7901细胞HGC-1的表达,且作用随着氧化苦参碱浓度的增加而增强。(2)氧化苦参碱通过抑制NF-κB活性,下调HGC-1基因的表达,这可能是氧化苦参碱抗癌的机制之一。
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