本文主要从以下几个部分展开论述:　　第一部分 淋巴管内皮细胞通过NIK介导的途径调节B细胞的淋巴结归巢　　目的:淋巴细胞在中枢淋巴器官发育成熟后，经血流定居在外周淋巴器官，并在全身器官、组织以及炎症部位发挥多种生物学功能。淋巴细胞归巢是淋巴细胞迁移的一种特殊形式，不同群或亚群的淋巴细胞在移行过程中具有相对选择性，即某一特定的淋巴细胞群或亚群定向归巢到相应的组织或器官。淋巴细胞归巢过程的分子基础是淋巴细胞与各组织、器官血管内皮细胞粘附分子的相互作用。其中，B细胞归巢到淋巴结的过程需要通过高内皮小静脉在趋化因子（尤其是CXCL13）的指导下完成。然而，CXCL13并不是由高内皮小静脉直接产生，其如何介导B细胞归巢到淋巴结的分子机制目前还未阐明。NF-κB信号通路参与免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、肿瘤发生等多种生物进程。NIK作为非经典NF-κB途径的关键分子也在维持完整的淋巴系统功能，特别是在维持完整的淋巴结和B细胞群，发挥重要作用。但对于其在淋巴管内皮细胞中的作用仍不甚明了，本研究旨在探索淋巴管内皮细胞中的NIK分子对于淋巴管功能的影响及其分子机制。　　方法:本研究将NIK-flox小鼠与Lyve1EGFP-hCre小鼠交配繁育出淋巴管内皮细胞条件性敲除NIK的小鼠（NIKLEC-KO，NIKfl/flLyve1+/Cre）及同窝对照的野生型(NIK+/+Lyve1+/Cre)小鼠。首先通过流式细胞术对小鼠的免疫器官进行表型分析，并通过耳部淋巴回流功能检测和异硫氰酸荧光素着色实验，评价NIKLEC-KO小鼠淋巴管引流液体和运输树突状细胞的功能。然后利用体内归巢实验检测主要细胞亚群的归巢情况。通过RT-qPCR分析相关趋化因子的表达，最后免疫小鼠通过酶联免疫吸附试验检测小鼠的抗体分泌能力以评价其体液免疫功能。　　结果:在本研究中，发现介导非经典NF-κB途径活化的激酶NIK对淋巴管内皮细胞介导的B细胞归巢到淋巴结发挥了重要作用。淋巴管内皮细胞条件性敲除NIK的小鼠并未表现出淋巴管的完整性破坏或整体功能的异常，但却表现出淋巴结中的B细胞比例显著降低。而在该小鼠脾脏中并未出现B细胞比例及生存状态的异常。B细胞的过继转移实验发现淋巴管内皮细胞特异性敲除NIK使淋巴结招募B细胞的功能发生障碍。此外，本研究进一步发现NIK介导淋巴管内皮细胞CXCL13和CCL19的表达。　　结论:NIK是通过调节淋巴管内皮细胞产生B细胞归巢趋化因子CXCL13进而使初始B细胞归巢到淋巴结。　　第二部分 SAPHO综合征外周血γδT细胞相关研究　　目的:SAPHO综合征是累及皮肤和骨关节的慢性无菌性炎症，主要表现为滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨肥厚、骨炎。SAPHO综合征的发病原因及发病机制尚不清楚。有研究报道SAPHO综合征患者外周血中Th17比例升高。由于γδT细胞也是IL-17的一个重要来源，有可能参与SAPHO综合征的疾病进程。因此，本研究从检测SAPHO患者外周血γδT细胞表型入手，进而分析γδT细胞受体(TCRγδ)抗原互补决定区3(CDR3)的特征和双磷酸盐治疗后对外周血γδT细胞的影响，从三个方面试图探索γδT细胞是否参与SAPHO综合征的疾病进程。　　方法:42名SAPHO综合征患者被按照可视化的模拟量表(VAS)疼痛评分和巴斯强直性脊柱炎活动指数(BASDAI)，分为疾病活动期患者（18名）和疾病稳定期患者(24名)两组;另外，16名健康志愿者被用作对照。我们用流式细胞术分析并对比了这三组外周血单核细胞中γδT细胞的相关表型，并分析了这些指标与患者的VAS和BASDAI的相关性。接下来，我们用特异性PCR和高通量测序的免疫组库技术分析并对比了分别来自疾病活动期（4名）、稳定期（4名）的8名患者以及4名健康对照外周血单个核细胞样品中TCRγδ CDR3的特征。第三步我们采集30名纳入博宁-帕米膦酸二钠临床试验的SAPHO患者治疗前后的外周血，通过流式细胞术分析患者外周血γδT细胞的相关表型变化。最后，通过ELISA检测SAPHO患者血浆中CCT5的水平。　　结果:SAPHO患者外周血总的γδT细胞比例较健康对照显著下降，其中疾病活动组下降的尤为明显;患者Vδ1T细胞在患者中显著下降，而Vδ2T细胞没有差异;CD27+/CD27-γδT细胞的比值在活动期SAPHO患者中显著低于健康对照和稳定期患者。患者γδT细胞比例与VAS和BASDAI这两个疾病指标都没有显著的相关性，但Vδ2/Vδ1 γδT细胞和CD27+/CD27-γδT细胞两个比值与SAPHO的疾病进程呈现显著负相关，其中Vδ2/VS1 γδT细胞比值与VAS呈显著负相关，而CD27+/CD27-γδT细胞比值与VAS和BASDAI都呈现显著负相关。免疫组库结果发现所有SAPHO患者和稳定期患者的δ链多样性较健康对照显著降低;在出现频率前50的δ链CDR3序列中，克 隆大小＞10％的CDR3序列数SAPHO活动期患者显著低于健康对照，而＞1％的CDR3序列数SAPHO稳定期患者显著高于健康对照;患者的γ链与对照相比，倾向于使用更短的CDR3区，而这种缩短并不是由于随机插入片段长度变短引起的;在TCRγδCDR3 V/J胚系基因片段取用频率方面，SAPHO综合征患者与健康对照的差异主要集中于γ链，包括TRGV3取用频率降低和TRGV5、TRGJ1取用频率升高。在应用双磷酸盐治疗后，SAPHO患者外周血Vδ2T细胞比例降低，Vδ1T细胞比例没有变化，记忆型γδT细胞比例降低，Vδ2T细胞向效应细胞分化增加。最后，活动期SAPHO患者血浆CCT5水平低于健康对照和稳定期患者，使用双磷酸盐治疗可以提高血浆CCT5水平，血浆CCT5水平与SAPHO疾病活动性评分VAS及BASDAI均有显著的负相关性。　　结论:γδT细胞，尤其是CD27-的γδT细胞亚群在SAPHO综合征的疾病进程中可能发挥一定的作用。SAPHO综合征患者的γδT细胞发生了一些与疾病相关的免疫组库特征的改变，Vδ2T细胞可能在双磷酸盐治疗SAPHO的过程中发挥一定作用，本研究为γδT细胞在SAPHO综合征疾病进程中发挥一定的作用提供了证据。