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背景与目的:机体抗肿瘤的免疫机制十分复杂,它涉及多种免疫成分,包括体液免疫和细胞免疫。它们互相协同杀伤肿瘤细胞。一般认为,以T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞为主的细胞免疫发挥着重要的作用。如果能研究一种可靶向树突状细胞或者巨噬细胞的给药系统,则有望提高抗原靶向树突状细胞或者巨噬细胞的能力,增加抗原提呈,促进免疫应答,增强抗肿瘤作用。本文根据树突状细胞和巨噬细胞表面有甘露糖受体的表达,制备了含有模型蛋白(卵清蛋白,OVA)的甘露糖修饰的壳聚糖包衣的乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,研究其靶向树突状细胞和巨噬细胞的能力。方法:合成了甘露糖修饰的壳聚糖之后,采用复乳法制备了含有OVA的PLGA纳米粒,壳聚糖(CS)以及甘露糖修饰的壳聚糖(MAN-CS)包衣的PLGA纳米粒。研究了不同因素,对纳米粒粒径、载药量和体外释放的影响。接着考察了纳米粒的浓度和孵育时间对于巨噬细胞的毒性的影响,以及通过荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪和共聚焦显微镜考察不同孵育温度、时间、浓度,甘露糖对于巨噬细胞摄取的影响,和纳米粒在细胞内的定位。最后分离小鼠骨髓的单个核细胞,体外诱导其分化形成树突状细胞;通过流式细胞仪分析树突状细胞对纳米粒的摄取,以及激光共聚焦显微镜(CLSM)考察纳米粒在细胞内的定位。结果:通过红外光谱、核磁图以及元素分析确认了已合成出甘露糖修饰的壳聚糖。PLGA纳米粒制备的最优处方为内水相pH值4.0,PLGA浓度为30mg·mL-1,外水相PVA浓度为5%,油水相比为1:3,超声次数为120次。使用最优处方制得的纳米粒粒径在255nm左右,OVA的包封率约为70%,载药量约为8%。CS包衣纳米粒的粒径和zeta电位,随着CS浓度的增加而增加。在内水相中加入PEG1000、外水相添加蔗糖、CS和MAN-CS包衣均能较少PLGA纳米粒的突释。纳米粒对巨噬细胞基本不产生毒性。4℃时,巨噬细胞的吞噬受到抑制;8h时,巨噬细胞对于纳米粒的摄取已接近饱和;在实验的浓度范围内,巨噬细胞对于游离的FITC-OVA和纳米粒的摄取是逐渐增加的。甘露糖能抑制了MAN-CS包衣的PLGA纳米粒的摄取。荧光酶标仪、流式细胞仪结果表明,巨噬细胞对MAN-CS包衣的纳米粒摄取最多;CLSM表明纳米粒的主要定位在细胞质内。小鼠骨髓的单个核细胞在体外用GM-CSF和IL-4诱导可分化为未成熟树突状细胞,其表面高表达CD11c;流式细胞仪的结果表明,树突状细胞对含有FITC-OVA纳米粒的摄取比游离的FITC-OVA多,且对MAN-CS包衣的纳米粒摄取最多。结论:本文通过单因素考察确定了PLGA纳米粒制备的最优处方,使用此处方制备纳米粒重现性好;以PLGA纳米粒制备的最优处方为基础,采用复乳法成功地制备出含有OVA的CS以及MAN-CS包衣的PLGA纳米粒。MTT实验表明纳米粒的毒性较低。体外细胞实验表明MAN-CS包衣的PLGA纳米粒能有效地被树突状细胞和巨噬细胞摄取。