水痘和带状疱疹是在世界范围内流行的、由水痘-带状疱疹病毒（VZV）引起的传染性疾病。目前对上述疾病唯一有效且可靠的预防控制手段是接种相应疫苗,即水痘减毒活疫苗和带状疱疹疫苗（包括减毒活疫苗和重组疫苗）。其中,水痘减毒活疫苗和带状疱疹减毒活疫苗均采用Oka株作为疫苗生产用毒株,用于预防带状疱疹的活疫苗所含病毒量至少是水痘减毒活疫苗的14倍。疫苗制品的安全性、有效性和质量可控性是保证疫苗免疫效果的基础。其中,疫苗效价作为有效性评价的主要指标,是各种疫苗生产与研发过程中的重点关注检项。对于活病毒,目前以病毒滴定结果（即病毒滴度）对水痘减毒活疫苗和带状疱疹疫苗的效力进行评价,法定检定方法（《中华人民共和国药典三部（2020年版）》中收录）为蚀斑法。该方法存在检测周期长、人为误差大、重复性差等缺点。VZV表面有9种糖蛋白,包括g E、g H、g L等,与病毒的致病性和免疫原性有密切关系。ELISA检测可通过对VZV表面糖蛋白进行定量来确定具有完整结构的病毒颗粒数量,从而与蚀斑法检测结果之间建立良好的相关性。鉴于可实现对目的蛋白质快速、准确、高效地定量检测,ELISA法是一种潜在的、替代蚀斑法的方法。本论文为了建立可快速检测VZV糖蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA法,首先对蚀斑法进行方法优化并验证,以便与ELISA方法检测结果建立相关性。优化内容包括覆盖物种类、甲醛固定步骤的必要性、吸附条件、染色条件,验证内容包括重复性、准确性与精密性。其次,用抗VZV糖蛋白基因工程抗体建立双抗体夹心ELISA法,检测VZV糖蛋白抗原含量,并与蚀斑法检测结果建立相关性;优化内容包括抗体组合、抗体工作浓度、包被条件、封闭条件、酶标抗体反应条件、显色条件;验证内容包括特异性、线性、准确性、精密性。优化后的蚀斑法具有较高的准确性、重复性及人员间精密度。经验证,所建ELISA方法与蚀斑法具有良好的相关性,对VZV糖蛋白特异性良好,与其它成分无交叉反应;线性范围为500～2600 PFU/m L,R~2＞0.95;批内回收率在82.2～115.7%,变异系数＜10.2%;批间回收率在80.5～118.6%,板内变异系数＜17.4%,板间变异系数＜14.9%。综上,本文建立了一种针对VZV糖蛋白抗原的双抗体夹心ELISA检测方法,该方法定量结果与蚀斑法检测结果具有相关性,通过计算间接得到病毒滴度。该方法符合VZV病毒滴度定量检测的需要,可应用于水痘减毒活疫苗和带状疱疹疫苗研发和生产过程,对中间产品和成品的病毒滴度进行快速、高效、准确的检测。