miR-142-3p调控朊病毒致病作用的研究

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangdefeng1983
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朊病毒病,是一类致死性并且有传染性的中枢神经系统变性疾病,主要传染物质是错误折叠的朊蛋白(scrapie isoform of prion protein,PrPsc)。朊病毒疾病中疯牛病的爆发给一些国家的畜牧业造成巨大的打击,而感染疯牛病的牛肉进入消费市场后,严重影响人们的身体健康。关于朊病毒疾病的致病机理至今不清楚,研究者们发现miRNA调控网络的异常是朊病毒发生的一个潜在因素。microRNA(miRNA)是一类大小为18~24个核苷酸(nucleotide,nt)的非编码小RNA,虽然研究者们陆续发现一些与朊病毒疾病相关的miRNA,但是它们对朊病毒病的作用还没有完全被人们所了解。本研究首先用Real Time PCR检测朊病毒病小鼠大脑、海马等脑组织中miR-142-3p表达情况,进一步利用ScN2a细胞模型(感染朊病毒因子22L的成鼠神经瘤细胞)探讨miR-142-3p对朊病毒致病的作用。从而为探究朊病毒病的发病机制奠定基础,对于尽快研究出疯牛病等朊病毒病有效的诊断和检测方法有重要指导作用。研究结论:1.通过Real time PCR检测发现miR-142-3p在大脑、海马等脑组织中表达上调。2.形态学分析表明,miR-142-3p高表达时能促进ScN2a细胞聚团,细胞体积变小,细胞质中产生圆形空泡等类似神经变性现象;MTT结果表明ScN2a细胞转染miR-142-3p inhibitors或miR-142-3p Mimics24h后,miR-142-3p过表达能显著抑制ScN2a细胞的增殖,低表达相对高表达组能促进ScN2a细胞的生长,72小时后低表达组ScN2a细胞的存活率明显高于对照组。3.透射电镜显示高表达组的ScN2a细胞质中出现脂质沉积物,线粒体出现空泡化现象,胞浆中出现空泡。4.Western blot结果显示,miR-142-3p过表达时能显著增加PrPsc的表达,低表达时能降低PrPsc的表达。5.生物信息学预测miR-142-3p的靶基因参与细胞大分子定位、蛋白转运、小囊泡介导的转运、转录调控、神经元的发育以及细胞的分化、神经元分化和神经元突触的形态发生等生物学过程,可能通过ATF7IP、MYH9等靶基因促进朊病毒病发生。
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