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端粒酶作为癌症发生、发展过程中的一种关键酶类,其活性分析可用于癌症的早期诊断及肿瘤的恶性程度的判断。有关端粒酶的活性分析技术近年来获得了飞速的发展,一些新型的端粒酶活性检测方法相继诞生,如端粒酶重复序列扩增法(TRAP)及在此基础上发展起来的一系列改进方法,其中实时定量PCR(RTQ-TRAP)被认为是最有前景的。本论文通过采用一种独特的PCR扩增策略,成功地将端粒酶反应产物特异性分子信标探针引入到了端粒酶活性的PCR检测当中,开发了一种新型的RTQ-TRAP分析方法。在该方法中,分子信标探针的使用不仅极大地提高了检测的特异性,同时可以使检测结果能够真实地反映出端粒酶的延伸能力。此外,实时全封闭的检测过程不仅省去了繁琐的PCR后产物检测步骤,使其更适用于样品的批量检测,而且避免了产物的交叉污染,减少了假阳性结果的产生。将该法应用于人工合成端粒酶产物及细胞提取物中端粒酶活性的检测,结果表明该法具有良好的检测灵敏度及特异性,可望应用于临床样品中端粒酶活性的检测。将开发的方法应用于Mn2+及两种Mn(Ⅱ)配合物对端粒酶活性的调节作用研究,发现Mn2+及两种Mn(Ⅱ)配合物都存在有一定增强端粒酶活性的能力,其中一种配合物具有明显更强的酶激活能力,它可以使端粒酶的活性增加近8倍,有望发展成为一种新型的药物,用于抑制衰老、抗血管硬化、器官移植和组织的再生、治疗肝硬化等方面。为了考察该配合物可能存在的细胞毒性,对Mn2+及两种Mn(Ⅱ)配合物的DNA切割能力进行了研究,实验结果表明:在没有H2O2存在的条件下,配合物对DNA没有切割的活性,说明配合物的细胞毒性可能较小:在有H2O2的存在下,配合物可以比Mn2+和相应的配体更有效地将超螺旋DNA切割成缺口型和线型DNA,而且切割并不具有选择性,有望发展成为一种有效的化学核酸酶。电子吸收光谱和荧光光谱研究表明这两种配合物以多种方式和DNA结合。