体外培养人眼小梁细胞血管紧张素Ⅱ的表达

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目的传代培养人眼小梁细胞并用不同方法检测血管紧张素Ⅱ在体外培养的人眼小梁细胞中的表达,探讨肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin systym RAS)通过自分泌、旁分泌和(或)胞内分泌参与眼压调节的方式,为眼压的自稳与调节研究开辟新思路,为研究治疗青光眼的新药提供理论依据。方法人眼小梁细胞进行常规传代培养,取第二代小梁细胞融合后消化培养制作细胞爬片,爬片细胞经免疫组织化学SP法检测确定小梁细胞胞浆中有血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡAngⅡ)的表达;取第三代近融合小梁细胞经Western blot方法检测细胞中AngⅡ蛋白的表达。结果1通过免疫组化染色显示:AngⅡ在体外培养的人眼小梁细胞中表达呈强阳性,表现为细胞胞浆中棕黄色阳性颗粒,细胞核衬染为兰紫色,对照胞浆内未见阳性信号。2 Westen-blot方法显示人眼小梁细胞中AngⅡ蛋白的表达呈阳性。结论1体外人眼小梁细胞的培养是进行青光眼研究的重要方法。2经免疫组织化学及Western blot法检测体外培养人眼小梁细胞内AngⅡ的表达均为阳性,说明人眼小梁细胞具有独立合成AngⅡ的能力,推测RAS可能参与了眼压的自稳与调节并参与了小梁组织的生理病理性改变,与青光眼的发病有关。
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