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2010年发生的大连输油管道爆炸,海域溢油分布面积约38平方公里,对当地海域的环境和生物资源造成了严重的危害。鉴于此次泄漏的主要为原油,具有挥发性差、海上滞留时间长且难以降解等特点,将给当地的生态环境造成长期的影响,因此有必要对此次石油泄漏污染区的生物损伤进行长期的跟踪及评价。本论文以细菌群落的种群结构及多样性为污染损伤评价的生物学指标,采用改良的双荧光标记T-RFLP技术,对大连新港石油泄漏前后海域内7个不同取样点的底泥样品进行了分析,进而对本次石油污染的状况进行了初步的生物损伤评价。论文取得如下研究结果：1.建立并首次使用双荧光标记T-RFLP对细菌菌群结构进行研究,与常规T-RFLP方法相比,具有重复性好、一次实验获得双倍限制性片段(T-RFs)信息用于分析等特点,大大提高了分析效率和准确性。2.对石油泄漏前后海域内7个不同取样点的底泥样品进行了细菌群落分析,结果表明,此次溢油事故的确对当地海域的细菌多样性产生了影响。通过对双荧光标记T-RFs数目的分析发现,溢油前后T-RFs出现相反变化趋势的样地包括s3(旅顺老铁山)、s6(长兴岛)和s15(大连湾),分别与溢油事件的发生及所在的地理位置相关。其中样地s15(大连湾)为此次溢油事故的发生地；样地s6(长兴岛)位于渤海湾内,海水交换能力较差；样地s3(旅顺老铁山)位于黄、渤海的交界处,海水交换能力较强。样地间相似性分析及聚类的结果进一步验证了上述结论。通过对细菌优势群落结构的分析发现,7个样地在溢油前后的优势细菌群落及其所占百分比均发生不同程度的变化。