硫酸钙复合骨形态发生蛋白-2功能多肽修复骨缺损的研究

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:uuuuurzm
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第一部分骨形态发生蛋白-2功能多肽的合成及其体外成骨诱导活性研究目的:研究骨形态发生蛋白-2功能多肽P24的合成及其体外成骨诱导活性。方法:FMOC/tBu固相合成法合成骨形态发生蛋白-2(BMP-2)核心区的功能多肽P24。配备含10μg/ml和30μg/ml P24的两种SD大鼠间充质干细胞(MSC)完全培养液,与SD大鼠MSC完全培养液及SD大鼠MSC成骨诱导完全培养液分组培养SD大鼠MSC。培养2周和3周时分别检测各组碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:FMOC/tBu固相合成法成功合成了BMP-2的功能多肽P24。培养2周和3周时,含30μg/ml P24的完全培养液组ALP活性明显高于成骨诱导完全培养液组。结论:通过FMOC/tBu固相合成法合成的BMP-2的功能多肽P24具有体外成骨诱导活性,含30μg/ml P24的MSC完全培养液成骨诱导能力最强。第二部分硫酸钙复合骨形态发生蛋白-2多肽修复骨缺损的实验研究目的:研究硫酸钙(CS)复合BMP-2功能多肽P24修复骨缺损的能力。方法:新西兰大白兔60只,随机分为5组,即空白组(A组)、CS组(B组),50μgP24/2gCS组(C组),100μgP24/2gCS组(D组),200μgP24/2gCS组(E组)。在兔股骨髁造成直径7mm,深10mm的腔隙性骨缺损,按照分组植入材料。术后第4、8、12周分组处死兔子,分别进行大体标本、X线、Micro-CT以及组织学观察,比较各组材料修复骨缺损的能力。结果:大体标本观察:术后12周,A组骨缺损仍然明显,B组骨缺损区大部分修复,C、D、E组骨缺损完全修复。X线观察:对术后12周各组标本骨缺损修复情况进行X线评级,C、D、E组明显优于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Micro-CT检测:术后12周骨计量学指标显示,C、D、E组骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)及结构模型指数(SMI)的测量结果均优于B组,D、E组各项指标均优于C组,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。组织学观察:术后12周,A组骨缺损明显,基本由纤维结缔组织填充;B、C、D、E组材料完全降解,骨缺损区域由新生骨填充,其中C、D、E组骨小梁密度高于B组,D、E组优于C组。结论:P24功能多肽在动物体内具有较强的促进骨修复的能力;复合P24功能多肽可提高硫酸钙修复骨缺损的能力;按100μgP24/2gCS比例复合的材料修复骨缺损可获得满意效果。
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