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自然条件下,罗非鱼的繁殖周期较短,繁殖后代需消耗大量的能量而影响其生长速度。针对罗非鱼个体在生长方面的性别二态性,生产上采用单雄性养殖以提高养殖产量与效益。全雄罗非鱼苗种的获得主要通过种间杂交或性激素诱导获得。本文用雄性激素17α-甲基睾酮(MT)处理尼罗罗非鱼鱼苗,研究MT对尼罗罗非鱼雄性率的影响及残留情况,并通过荧光定量PCR的方法测定激素处理后类固醇酶基因的表达情况,同时用微卫星方法检测尼罗罗非鱼性别相关标记。尝试从分子机理上阐明影响性别决定的基因位点及影响鱼类性别决定的分子机制,为人工控制鱼类性别、培育单性鱼以及为生产实践中有效地提高群体生长率、控制繁殖速度、提高商品鱼的规格和质量提供理论基础,对罗非鱼生产有指导意义。主要研究结果如下:1、本文采用不同浓度梯度17α-甲基睾酮(17α-Methyltestosterone,MT)饲料(5,10,30,50和60mg?kg-1)处理孵化后10天的尼罗罗非鱼鱼苗30天,之后改喂正常饲料继续进行养殖。经过4个月的饲喂后,MT处理组的绝对增长率、绝对增重率、瞬时增长率和瞬时增重率等参数均与对照组间存在显著差异(P<0.05)。统计鱼苗雄性率,发现高浓度处理组(50mg?kg-1和60 mg?kg-1 )雄性率超过99%,低浓度处理组(5mg?kg-1和10mg?kg-1)雄性率则低于80%。MT处理30天后,对照组与处理组MT残留量分别为0μg?kg-1 (对照组)<23.19μg?kg-1 (5 mg?kg-1 )<30.82μg?kg-1 (10 mg?kg-1 )<37.76μg?kg-1 (30 mg?kg-1 )<44.75μg?kg-1 (50mg?kg-1)<68.41μg?kg-1 (60mg?kg-1)。残留量与MT添加量呈现正相关。继续投喂正常饲料30天后,在各浓度处理组均未检测到MT残留。以上研究结果表明:MT处理30天可提高罗非鱼苗雄性率,促进生长;MT处理后60天,均检测不出MT残留。2、本实验用浓度为10mg?kg-1的MT、Letrozole分别腹腔注射尼罗罗非鱼,在注射后12h、24h、48h、7d、14d、21d时检测P450arom、11β-HSD2、P450Scc基因表达量。发现三个基因初始表达量均下降,而后回升。在用MT注射尼罗罗非鱼后,检测发现P450Scc基因最先受到抑制,P450arom和11β-HSD2次之;而用芳香化酶抑制剂Letrozole注射尼罗罗非鱼后,检测发现P450arom和P450Scc较先受到抑制,而11β-HSD2次之。这表明:MT可能是通过调节P450Scc基因水平进而降低了P450arom的表达量,而芳香化酶抑制剂Letrozole为直接调节P450arom基因进而对鱼类的性别造成影响。3、从GenBank上选取10对(UNH104,GM041,GM663,UNH168,UNH846,UNH931,UNH148,UNH985,UNH995,GM258)微卫星引物,分别对雌雄尼罗罗罗非鱼基因组进行扩增。结果表明:雌性尼罗罗非鱼群体各位点的多态信息含量在0.3416~0.6741之间,雄性尼罗罗非鱼群体各位点的多态信息含量在0.2641~0.6769之间,均为中度多态性位点或高度多态位点。雌鱼群体中平均观测杂合度为0.4442,平均期望杂合度为0.5913。雄鱼群体中平均观测杂合度为0.5500,平均期望杂合度为0.5660。这两个群体遗传多样性均比较丰富。另外,经检测发现这10个位点在雌雄尼罗罗非鱼群体之间并未有不同。