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目的探索脊髓损伤后内皮祖细胞的脊髓内移植是否为脊髓的恢复提供神经保护作用,为内皮祖细胞移植治疗脊髓损伤的研究提供理论基础。方法从80-100 g SD大鼠双后肢提取骨髓经梯度密度离心后,经诱导培养基培养两周后用细胞形态学和细胞功能学鉴定为内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs),用CM-Dil染料标记后制成浓度为1×105个/ml细胞悬液备用。用改良Allen法在成年SD大鼠上制造脊髓损伤模型,并立即在损伤部位硬膜下注射EPCs悬液,同时注射EPCs培养基作为对照。对所有大鼠脊髓损伤模型分别在损伤后1、2、3、4、5、6w评估大鼠后肢功能运动评分(BBB score)。分别在1w和2w末取出脊髓,直接在荧光显微镜下观察CM-Dil标记细胞位置。用WB测量脊髓损伤部位VEGF蛋白表达量,免疫组织化学方法检测局部血管数量及血管新生程度、凋亡细胞比例。脊髓损伤6w末用免疫组化方法检测局部神经元和星形胶质细胞数量、HE染色横断面观察脊髓损伤情况。结果(1)脊髓损伤后硬膜下移植EPCs后,EPCs在局部损伤部位可以存活,并且可以迁移到脊髓实质。(2)脊髓损伤1w、2w后EPCs移植组VEGF蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05)。在2w末EPCs移植后脊髓局部内皮细胞数目比例(38.32±1.49%vs19.02±0.47%,P<0.05)和新生血管(16.12±0.79%versus7.61±0.63%,P<0.05)较对照组较多,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)手术2w后实验组大鼠局部脊髓凋亡细胞数量比例明显少于对照组(38.50±5.01%vs 18.67±1.86%,P<0.05)。(4)脊髓损伤6w后EPCs移植大鼠损伤部位神经元数量比例(32.04±3.33%vs 19.34±2.70%,P<0.05)明显多于对照组大鼠,HE染色观察实验组组织空洞面积小于对照组(27±4.59%vs59±3.27%,P<0.05),差异有统计学意义。(5)。随着手术后时间的延长,实验组和对照组大鼠的运动功能均有改善,BBB评分逐渐升高,且在每个时间点实验组大鼠BBB评分稍高于对照组大鼠,在术后第6w EPCs移植大鼠评分达到7.7±1.34,EPCs培养基移植大鼠评分为6.1±1.10,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓损伤后移植内皮祖细胞可以为损伤局部细胞提供神经保护作用,从而促进运动功能恢复。