板蓝根作为中国传统中药,一直以来是临床上常用的广谱抗病毒药物,广泛用于治疗流感、腮腺炎、流行性乙型脑炎、肝炎等疾病。但其清热解毒的实质和抗病毒的物质基础一直颇有争议。为了探明板蓝根的主要活性物质,本文从多肽和氨基酸入手,采用现代的分离纯化技术和检测手段对其进行了提取分离,并进行了抗病毒活性研究。主要结果如下：1、板蓝根总多肽的提取工艺研究采用水浸提工艺,在单因素试验的基础上,采用提取溶剂,提取时间,溶剂量三因素三水平正交试验以优化工艺条件,以新版国家标准凯氏定氮法和BCA法测定多肽含量,并对这两种方法测定所得结果进行综合分析。结果表明,这两种方法所测总多肽得率相差很大。用凯氏定氮法测定所得最佳工艺,为15倍量纯水浸泡24h；用BCA法测定则为即用15倍量超纯水4℃浸提24h。2、板蓝根中四种主要氨基酸的含量测定本实验采用柱前衍生化法测定不同产地板、不同提取方法所得蓝根药材中四种氨基酸的含量。方法：对板蓝根样品,用2,4-二硝基氟苯进行衍生,安捷伦ODS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分离,以乙腈-磷酸盐缓冲溶液为流动相,梯度洗脱,测定氨基酸含量。结果表明：该法操作简单,重复性好,准确可靠,可以作为板蓝根饮片质量控制的一种方法。3、板蓝根多肽在模拟胃肠环境中的降解研究采用调整溶液pH法终止酶解反应、BCA法检测板蓝根多肽浓度变化情况、SDS-PAGE凝胶电泳法检测板蓝根多肽的降解情况、HPLC法检测板蓝根小分子物质降解情况。结果表明：板蓝根多肽在人工胃液和人工肠液中均有不同程度的降解且大部分转化成为多肽,另在人工肠液中产生少量碱性氨基酸。4、阳离子交换树脂除板蓝根多肽中多糖的工艺研究本实验以多糖去除率及多肽的保留率为指标,考察不同树脂对板蓝根多肽中除总糖效果的影响。分别进行静态吸附试验和动态吸附试验,对三种阳离子交换树脂进行筛选,测定解吸率,确定最大上样量,然后确定洗脱工艺,最后进行放大试验以验证工艺的工业生产可行性。试验结果表明,最适宜进行板蓝根多肽溶液中除糖的阳离子交换树脂型号为001×14.5,其比上柱量为0.5g/g,洗脱工艺为：以1BV/h的流速上样,静置10min。以2BV/h的流速,用2BV蒸馏水冲柱,然后改用3BV pH9.5的氨水作洗脱剂,2BV/h洗脱树脂。放大试验结果说明,此工艺流程适用于工业化生产。5、板蓝根多肽抗流感病毒活性研究本文以甲型流感病毒鼠肺适应株H1N1(A/PR8/34)滴鼻感染SPF级雌性昆明小鼠,观察板蓝根多肽对H1N1病毒感染小鼠死亡保护率、肺指数、肺组织病毒滴度和免疫功能的影响,用以考察板蓝根多肽抗流感病毒活性。结果表明：①在感染小鼠死亡保护率试验中：与病毒模型组比较,板蓝根多肽大剂量组死亡率极显著减小(p<0.01),平均生天数极显著增加(p<0.01)；板蓝根多肽中剂量组死亡率显著减小(p<0.05),平均生天数显著增加(p<0.05)。本实验结果证明,板蓝根大剂量多肽和中剂量多肽均对H1N1感染小鼠具有一定的死亡保护作用。②在感染小鼠肺指数试验中：板蓝根多肽大剂量组与感染模型组比较肺指数均极显著降低(P<0.01)；板蓝根多肽中剂量组与感染模型组比较肺指数均显著降低(P<0.05)。表明大剂量和中剂量板蓝根多肽均能降低流感病毒感染小鼠的肺指数,有减轻流感病毒引起小鼠肺部病变的作用。③在血凝滴度试验中：板蓝根多肽大剂量组与模型组相比有显著差异,说明其均可降低流感病毒感染小鼠的肺组织病毒血凝滴度。板蓝根多肽中剂量组和小剂量组与模型组相比均有降低,但差异不显著(P>0.05)。由此可见,大剂量板蓝根多肽可抑制流感病毒的复制。④在T细胞和B细胞的增值活性试验中,板蓝根多肽大剂量组较病毒模型组均有极显著提高(P<0.01);板蓝根多肽中剂量组较病毒模型组均有显著提高(P<0.05)。说明板蓝根多肽能显著提高流感病毒感染小鼠的T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖,从而提高机体的免疫功能。