基于适体生物传感器的肿瘤细胞检测

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肿瘤细胞,是人体内非正常生殖的一类细胞,它是人类健康最大的杀手之一,在现在医学中起着至关重要的角色,很多科学家和学者都为之奋斗、研究。癌症起源于基因的突变进而导致细胞在分子水平表现异常。许多年来,临床专家主要基于细胞的形态学和组织学研究,这往往不能准确的诊断并且经常不能有效的处理复杂分子上的改变,从而使得癌症的攻克受到了阻碍。因此,分子探针就显得格外重要,利用它去识别癌细胞的分子水平的特征,并且做出正确的判断,这会为临床治疗、诊断和科研研究做出巨大的贡献。本论文主要研究了多种新颖并且独特的电化学发光传感器,这些传感器主要基于联吡啶钌稳定的发光信号,其中结合了金胶纳米粒子、磁珠的放大作用和适体技术去检测细胞。以下是论文包含的内容:1.基于适体和磁珠设计了一种电化学发光生物传感器去检测Ramos细胞。联吡啶钌标记在信号DNA上,适体固定在磁珠上,在适体与信号DNA部分杂交后,由于适体对细胞具有高度亲和性,于是打下电化学发光探针进而固定到金电极上测定电化学发光信号,信号的大小间接表达了细胞的数量。检测范围是1.0×102-5.0×105cells mL-1,检测限是100cells mL-1,体现了良好的灵敏度和重现性。2.研制了一种基于适体和金胶纳米粒子生物条码探针间接检测Ramos肿瘤细胞的电化学发光生物传感器。标记了联吡啶钌的信号DNA和连接DNA标记到金胶纳米粒子上,氨基修饰的适体固定到羧基修饰的磁珠上,进而连接DNA和适体部分杂交,在Ramos细胞的存下的情况下,金胶纳米粒子生物条码探针被打下继而固载到金电极上测定电化学发光信号,从而得到Ramos细胞的检测限为50cells mL-1。并且这种方法可用于检测复杂样品的细胞中,通过金胶的放大作用,检测限降低,体现了高灵敏度、简便、低成本的特点。3.报道了一种不利用PCR技术的电化学发光方法检测Ramos细胞的方法并且具有很高的灵敏度。发光探针包括修饰在金胶纳米粒子上的连接DNA和标记了联吡啶钌的信号DNA,适体固定在羧基修饰的磁珠1上,继而适体与连接DNA杂交形成生物复合物,在Ramos细胞的存在下,由于细胞与适体的高度识别性,发光探针从生物复合物上释放出来,再次利用修饰了捕获DNA的磁珠2,让捕获DNA和发光探针上的连接DNA杂交,从而发光探针固定到了磁电极上,测电化学发光信号,检测范围为5-50000cells mL-1,检测限为5cells mL-1,由于金胶和两次使用磁珠,使得检测限大大降低。
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