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FSH和LH是脊椎动物的两种促性腺激素,对动物性腺发育和精卵发生具有重要的调节作用。目前在甲壳动物中这两种激素的生殖作用机理了解甚少。本研究以拟穴青蟹为研究对象,运用免疫细胞化学方法和酶联免疫分析技术,研究雌/雄激素受体、FSH和LH在神经系统的定位以及FSH、LH和三种性类固醇激素在生殖周期的浓度变化。综合各方面研究结果,探讨神经内分泌对性腺发育的调控作用。1.性类固醇激素受体在拟穴青蟹神经系统的免疫细胞化学研究ER、AR免疫阳性细胞的分布位置大致相同,在视神经节、脑和胸神经团均有不同程度的表达,雌、雄激素受体广泛存在于拟穴青蟹的神经器官中,有力证明了性类固醇激素可能与相应受体结合,通过对神经系统的反馈调节来影响其它激素分泌活动,间接调控拟穴青蟹生长和发育成熟,揭示了其对激素调节的具体作用方式。2.FSH和LH在拟穴青蟹胸神经团的免疫细胞化学研究FSH和LH在拟穴青蟹胸神经团的分布差异较大,同种抗体免疫阳性细胞在雌蟹和雄蟹的分布也有较大差异。FSH在成熟雌/雄蟹及未成熟雌/雄蟹的胸神经团均有明显的阳性反应,LH在成熟雌蟹胸神经团的阳性反应较弱,在未成熟雌蟹的胸神经团则表现为阴性反应;LH在成熟雄蟹的胸神经团阳性表达较强,阳性细胞类型与FSH类似,而未成熟雄蟹的LH阳性细胞较少且阳性较弱。FSH和LH在拟穴青蟹胸神经团的分布具有发育阶段的特异性,该差异与GSH的活性变化有一定程度的相关。结合FSH和LH在拟穴青蟹脑中的表达情况,更充分证明了FSH和LH是GSH的组分,FSH和LH可能参与调节性腺的发育和成熟。3.雌蟹血淋巴中激素含量变化E2在发育早期(Ⅱ期)时含量最低,在将成熟期(Ⅳ期)达到顶峰,随后逐渐降低。未发育期(Ⅰ期)雌蟹血清中17α-OHP含量最低,在Ⅱ期时略有增加,在卵黄发生初期时(Ⅲ期)达到第一次高峰,最高值出现在排卵后期。雌蟹FSH含量的高峰出现在Ⅱ期,Ⅲ期时略有下降,随后迅速减少,在Ⅳ期下降到0.105±0.031mIU/mL,到成熟期时已检测不出FSH含量。LH的含量整体水平较低,在Ⅳ期之前呈逐渐增加的趋势,Ⅳ期时达高峰,随后有所降低,在排卵后期时无阳性。E2在拟穴青蟹中可能具有促进卵黄发生和卵巢发育的作用。E2和17α-OHP的含量与卵巢发育具有一定的相关性,是卵巢发育的一定阶段所必需的。在拟穴青蟹FSH和LH可能刺激雌激素的产生,从而促进卵黄蛋白发生和卵巢发育,其功能与脊椎动物相似;E2和17α-OHP通过与脑和胸神经团内的雌激素受体结合,对FSH和LH的分泌作用进行反馈调节。在拟穴青蟹的早期发育阶段,这种反馈调节表现为正反馈作用,刺激脑和胸神经团FSH、LH的分泌。在性腺成熟时FSH和LH的含量变化趋势与性类固醇的含量则表现出负相关。4.雄蟹血淋巴中激素含量变化E2含量高峰出现在精子细胞期,发育到精子期时下降到最低值,在休止期时又有所回升。雄蟹精原细胞期血清中T含量大于精母细胞期,最高值出现在精子细胞期,精子期时略有下降。雄蟹FSH含量高峰出现在精子细胞期,精子期时FSH为阴性反应。LH的含量整体水平较低,在精子期时含量达到最高。拟穴青蟹血淋巴中E2和T含量变化的趋势同精巢的发育趋势相近,表明E2和T对精巢的发育有促进作用。拟穴青蟹FSH和LH具有共同调控促雄腺的功能,精子期之前调节作用以FSH为主,精子期之后,调节作用以LH为主。雄性青蟹的精巢发育过程受到FSH和LH的影响,FSH和LH作用于促雄腺,促进促雄腺激素合成和分泌,从而控制精巢生长发育的过程。我们同时在脑和胸神经团发现了雌激素和雄激素受体阳性细胞,可以推断性类固醇激素通过与脑和胸神经团内的雌/雄激素受体结合,对促性腺激素分泌进行反馈调节。