脉冲射频对SNI大鼠的镇痛作用及其机制研究

来源 :南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iris_1204
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目的:  观察脉冲射频(Pulsed Radiofrequency,PRF)作用于坐骨神经分支选择损伤模型(Spared Nerve Injury Model,SNI)大鼠坐骨神经分行为改变,检测背根神经节NF-κB、TNF-α、IL-6表达的变化,进而探讨脉冲射频治疗神经病理性疼痛的神经炎性反应相关机制。  方法:  1.实验对象  选取200~250g纯种雄性SD大鼠18只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、坐骨神经分支损伤组(SNI组)、坐骨神经分支损伤+脉冲射频组(SNI+PRF组),每组6只。  2.造模与取材  建立坐骨神经分支选择损伤模型(SNI):将一侧坐骨神经干的胫神经和腓总神经分支切断并结扎,保留腓肠神经分支。Sham组仅暴露但不损伤坐骨神经及其分支。SNI+PRF组于造模第7天对大鼠胫神经+腓总神经结扎近端行脉冲射频治疗,脉冲射频设定脉冲频率2Hz,脉宽20ms,温度42℃,治疗持续时间2min。Sham组和SNI组不予治疗,三组均于术后8天疼痛行为学测试结束后进行背根神经节(Dorsal Root Ganglion,DRG)取材。  3.检测指标  术前2小时及术后1、4、7、8天检测并记录各组大鼠疼痛行为变化,包括对50%机械刺激缩足反射阈值(Paw Mechanical Withdrawal Threshold,PMWT)和冷板累积抬足时间进行测定,以反映大鼠机械性痛觉过敏和冷触诱发痛变化;术后8天行为学检测结束后每组随机抽取4只对大鼠L4、L5背根神经节进行取材,行Western Blotting法检测背根神经节NF-κB、TNF-α和IL-6的表达。  结果:  1.50%机械刺激缩足反射阈值(PMWT):术前各组大鼠左后足PMWT比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1、4、7天,与Sham组相比,SNI组、SNI+PRF组PMWT均逐渐降低,具有统计学意义(P<0.05);SNI组与SNI+PRF组PMWT相比无统计学意义(P>0.05)。术后8天(PRF治疗后24小时),SNI+PRF组PMWT较SNI组明显上升(P<0.05);SNI组PMWT较Sham组进一步下降(P<0.05)。  2.冷板累积抬足时间:术前各组大鼠左后足累积抬足时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1、4、7天,与Sham组对比,SNI组、SNI+PRF组累积抬足时间显著延长(P<0.05),且呈逐渐上升趋势;SNI组与SNI+PRF组累积抬足时间相比差异无统计学意义(P>0.05)。术后8天(PRF治疗后24小时),SNI+PRF组大鼠累积抬足时间较SNI组缩短,具有统计学意义(P<0.05);SNI组累积抬足时间相较Sham组,仍维持在较高水平,差异有统计学意义(P<0.05)。  3.Western Blotting法检测结果:术后8天,SNI组大鼠背根神经节中NF-κB、TNF-α、IL-6的表达水平明显高于各组(P<0.05)。与Sham组比较,SNI+PRF组TNF-α、IL-6的表达增加(P<0.05),而NF-κB的表达无统计学差异(P>0.05)。与SNI组比较,SNI+PRF组NF-κB、TNF-α、IL-6的表达均减少(P<0.05)。  结论:  SNI大鼠神经病理性疼痛行为改变可能与背角神经节NF-κB的激活及致炎因子TNF-α、IL-6的释放相关,脉冲射频24小时即可明显缓解大鼠疼痛,其机制与神经炎性反应调节NF-κB、TNF-α、IL-6的表达有关。
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