苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)为革兰氏阳性菌，是一种具有高度特异性，应用范围最为广泛的，对环境友好的微生物杀虫剂。如今Bt已经被应用于商业化的农药制剂生产、森林蚊虫防治等方面。然而，现有Bt菌株和杀虫蛋白对很多重要的害虫没有切实的杀虫效果，因此需要分离筛选对常见农业害虫高毒力的Bt菌株，同时也需要研究不同Cry蛋白组合之间的协同增效作用。　　 本实验选取了筛选自黑龙江凉水国家自然保护区的31株Bt野生菌株作为研究菌株，对4种常见鳞翅目农业害虫进行了高毒力菌株的筛选。同时，针对现在国内生物测定试虫的人工饲养比较薄弱的问题，本实验还选择了三种不同的Bt Cry蛋白来进行混配毒力实验，以期发现有增效或是相加作用的蛋白组合。　　 1.本课题对小菜蛾、斜纹夜蛾、玉米螟及二化螟有高毒力的苏云金芽孢杆菌的野生菌株进行筛选。将分离自凉水国家自然保护区土壤中的31株Bt野生菌株作为研究菌株，定性测定筛选出其中10株Bt野生菌株作为杀虫活性较高的菌株。镜检发现，这10株Bt菌株均可产生菱形的伴孢晶体。SDS-PAGE分析发现这10株Bt菌株均产生约130kD的晶体蛋白。鉴定其基因型，发现这些菌株都含有cry1类基因。对菌株的生长曲线分析，发现这10株Bt菌株和标准菌株HD-73在LB培养基中的生长状况基本相似。这10株Bt菌株对4种鳞翅目害虫进行LC50和LT50的测定。分析生物测定数据，S2685-1和S2737-3是两株高毒力菌株，对小菜蛾、玉米螟、二化螟均表现出不错的杀虫活性，是可以深入研究的野生菌株。S2685-1和S2737-3可作为标准菌株HD-73的替换菌株，在农业害虫的综合防治以及抗性管理方面有一定的意义。　　 2.本课题对Cry1Ab、Cry2Aa以及Cry50Ba三种杀虫蛋白的增效作用进行了研究，结果表明：　　 对小菜蛾的增效实验中，Cry1Ab&Cry2Aa表现拮抗作用；　　 Cry1Ab&Cry50Ba表现相加作用；Cry2Aa&Cry50Ba表现相加作用；　　 对斜纹夜蛾的增效实验中，Cry1Ab&Cry2Aa表现拮抗作用；　　 Cry1Ab&Cry50Ba表现拮抗作用；Cry2Aa&Cry50Ba表现相加作用；　　 对玉米螟的增效实验中，Cry1Ab&Cry2Aa表现拮抗作用；　　 Cry1Ab&Cry50Ba表现拮抗作用；Cry2Aa&Cry50Ba表现拮抗作用；　　 对二化螟的增效实验中，Cry1Ab&Cry2Aa表现相加作用；　　 Cry1Ab&Cry50Ba表现相加作用；Cry2Aa&Cry50Ba表现相加作用。