烟草赤星病是烟草主要病害之一,自发现以来,严重影响着烟草的质量与产量,对我国的烟草生产带来了巨大的经济损失。目前,最常见的防治方式有种植抗（耐）病品种和化学药剂防治,但由于农业防治措施的局限性及长期使用化学药剂导致的病菌抗病性增强等原因,生物防治就成为了防治烟草赤星病最具有潜力及应用前景的防治方法。因此本文以烟草赤星病为研究对象,采用平板对峙法、室内离体试验、盆栽防效试验、田间防效试验等方法,筛选出对该病害具有一定防治作用的拮抗菌,并对其培养条件进行优化,拟为今后该类生防制剂的开发提供理论性的依据,具体研究结果如下:1.本文分别从2019年发生过严重赤星病病害与未发生赤星病病害的两处烟田内采集健康烟株的根际土壤,从中分离出了58株细菌,通过平板对峙法进行筛选后,获得了3株对烟草赤星病菌抑制率在50%以上的拮抗细菌,编号为T11、Y6和Y2。通过平板对峙,发现3株拮抗菌对烟草立枯病菌（Rhizoctonia solani）、烟草青枯病菌（Ralstonia solanacearum）、烟草黑胫病菌（Phytophthora nicotianae）、烟草炭疽病菌（Colletotrichum micotianae）也表现出了一定的抑制作用。将拮抗菌无菌发酵滤液与培养基比例为15%混合,接入赤星病菌培养7d后,T11、Y6和Y2菌株对病菌菌丝生长的抑制率分别为53.0%、59.6%、50.0%,在比例为5%的情况下,发酵滤液仍会影响赤星病菌菌丝的生长。通过镜检发现病菌菌丝膨大成念珠状,顶端膨大,变成结节状畸形菌丝,生长明显受到抑制。对3株拮抗菌进行生理生化及分子鉴定,发现T11菌株的形态及生理生化特征与枯草芽胞杆菌（B.subtilis）较为接近,检测其16S r DNA基因后发现T11菌株确定为芽孢杆菌属（Bacillus）,加测其gyr A基因,发现T11的基因序列与枯草芽胞杆菌SRCM102751（CP028217.1）相似度高达99%。鉴定该菌为枯草芽胞杆菌（B.subtilis）。Y6和Y2菌株形态及生理生化鉴定与贝莱斯芽孢杆菌（B.velezensis）较为接近,通过16S r DNA基因检测将其归类为芽孢杆菌属（Bacillus）,加测gyr A基因的结果表示两株菌都与菌株LF01（CP058216）都在同一分支上,该分支可信度为98%,鉴定Y6、Y2菌株为贝莱斯芽孢杆菌（B.velezensis）。2.通过单因素及正交试验确定了影响菌株生长的主要培养条件,对3个主要培养条件进行了Box-Behnken回归试验,通过响应面法分析优化培养条件,结果表明T11菌株的最佳培养条件组合为接种量2%,培养时间22 h,温度32.5℃,装液量110 m L,转速193 r/min,p H 7。最适培养基成分为:牛肉膏5 g/L、蔗糖15 g/L、Mg SO4·7H2O 15 g/L。Y6菌株最佳的培养条件组合为接种量3%,培养时间20 h,温度30℃,装液量108 m L,转速193 r/min,p H 6.6。最适培养基成分为:为酵母膏15 g/L、葡萄糖10 g/L、Mg SO4·7H2O 10 g/L。Y2最佳的培养条件组合为接种量3%,培养时间18 h,温度30℃,装液量109 m L,转速202 r/min,p H 6.8。最适培养基成分为:酵母膏5 g/L、葡萄糖15 g/L、Mg SO4·7H2O 5 g/L。3.3株拮抗菌株的发酵液防效试验表明,在离体试验中T11、Y6和Y2发酵液的平均防效分别为55.78%、62.85%、57.17%。盆栽试验中T11、Y6和Y2菌株的平均防效分别为51.20%、68.18%、59.81%。在田间小区实验中,40%菌核净防效为62.42%,拮抗菌中防效最好的为Y6菌株酵液10倍稀释液,其相对防治效果为53.28%;其次是T11菌株发酵液10倍稀释液,相对防治效果为44.5%。Y2菌株的10倍发酵液也有一定效果,相对防治效果为40.76%。