阳和平喘颗粒是安徽中医大学第一附属医院呼吸科通过总结多年临床经验制备的医院特色中药制剂,其对支气管哮喘的治疗具有显著疗效。该制剂是在《阳和汤》和《平喘汤》组方的基础之上加减所得,并结合现代制剂工艺制备而成的。该方由巴戟天、熟地黄、五味子、麻黄、旋覆花、白芥子、葶苈子、桔梗、当归九味中药组成,具有补肾纳气活血、化痰止咳平喘功效。已在临床上应用二十余年,疗效确切。课题组前期针对阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘大鼠进行了初步药效学研究,然而其具体作用机制尚不完全清楚,需要进一步寻求阳和平喘颗粒对支气管哮喘作用的潜在靶点。目的:从体内外观察阳和平喘颗粒对支气管哮喘大鼠和气道平滑肌细胞的炎症以及氧化应激指标的影响;以期揭示阳和平喘颗粒调控IKK/IκB/NF-κB信号通路抑制气道平滑肌细胞异常增殖和减少气道炎症的潜在分子机制。方法:1阳和平喘颗粒对OVA诱导的哮喘大鼠IKK/IκB/NF-κB信号通路的调控作用 按照随机原则将雄性SD大鼠（70只）分为正常组、模型组、阳和平喘颗粒（低、中、高）剂量组、桂龙咳喘宁胶囊组和氨茶碱片组,每组10只。采用卵清蛋白（OVA）腹腔注射致敏,雾化激发制备哮喘大鼠模型。阳和平喘颗粒组（3.69g/kg、7.38 g/kg、14.76 g/kg）、桂龙咳喘宁组（1.0 g/kg）以及氨茶碱片组（50 mg/kg）每天灌胃2次,连续14天。末次灌胃给足一天剂量,选择2%戊巴比妥钠,腹腔注射麻醉大鼠后取材。HE观察哮喘大鼠肺部病理变化。ELISA检测大鼠血清中炎症细胞因子:TNF-α、IL-6、IL-1β;氧化应激指标:NO、SOD、MDA的表达水平。RT-PCR检测IKK-β、IκB-α、NF-κB p65 mRNA的表达情况。WB检测IKK-β、p-IKK-β、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65的表达。2阳和平喘颗粒含药血清对大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）中IKK/IκB/NF-κB信号通路的调控作用 采用LPS诱导支气管平滑肌细胞（ASMCs）制备炎症模型,采用CCK8法筛选脂多糖（LPS）诱导ASMCs炎症损伤模型以及含药血清最佳给药浓度。将ASMCs分为正常对照组、模型组、模型组+最佳浓度含药血清组、模型组+最佳浓度含药血清组+通路抑制剂BAY 11-7082组。给药24和48h后,ELISA检测细胞炎症因子的表达。RT-PCR检测IKK-β、IκB-α、NF-κB p65 mRNA的表达。Western-Blot技术检测IKK/IκB/NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平。结果:1阳和平喘颗粒对OVA诱导的哮喘大鼠IKK/IκB/NF-κB信号通路的调控作用 模型组大鼠出现行为迟缓、打喷嚏、哮鸣音、体重下降且爪肿胀、紫暗等现象,阳和平喘颗粒组大鼠哮喘症状明显好转。观察模型组大鼠气道周围有炎症细胞浸润,组织增生情况,各给药组能够有效缓解上述情况。阳和平喘颗粒能显著降低TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、SOD的表达水平,升高MDA的表达水平,且呈剂量依赖性;同时IKK-β、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量呈上调趋势,IκB-αmRNA和其磷酸化蛋白表达水平出现下调趋势。2阳和平喘颗粒含药血清对大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）中IKK/IκB/NF-κB信号通路的调控作用 通过CCK8实验筛选出的LPS造模浓度为5μg/m L,最佳含药血清浓度为10%。在该条件下,阳和平喘颗粒含药血清能够有效的抑制炎症细胞因子,并下调IKK/IκB/NF-κB信号通路中IKK-β、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平,上调IκB-αmRNA和其蛋白表达水平。结论:本研究明确了阳和平喘颗粒对哮喘大鼠的治疗作用,并且验证了IKK/IκB/NF-κB信号通路为调节气道炎症反应的潜在分子机制,为临床应用提供一定的参考。