【摘 要】
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CaSC2(Sesquiterpene cyclase of Capsicum annuum),即辣椒倍半萜环化酶,是异戊二烯代谢过程中催化法尼基焦磷酸(FPP)合成各种倍半萜植保素前体的一个关键酶,在辣椒倍半萜植
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CaSC2(Sesquiterpene cyclase of Capsicum annuum),即辣椒倍半萜环化酶,是异戊二烯代谢过程中催化法尼基焦磷酸(FPP)合成各种倍半萜植保素前体的一个关键酶,在辣椒倍半萜植保素合成中起重要的调节作用。本研究从辣椒基因组DNA中分离获得CaSC2基因位于起始密码子ATG上游长度为1227bp启动子。根据该启动子的顺式作用原件分布,构建了其5’端5个系列缺失体,并分别构建其与GUS报告基因融合表达载体,利用农杆菌介导的烟草叶盘法转化本氏烟草,获得其转基因烟草植株及相应的T1代株系。通过检测在病原菌侵染及外源激素处理下CaSC2启动子5’缺失体T1代转基因株系中GUS基因的表达,分析了该启动子对不同逆境应答调控区域及可能的顺式作用元件。研究结果发现该启动子的TATA框位于起始密码子ATG上游-218 bp至-212之间的ATATAA,同时还含有多个与逆境胁迫相关的顺式作用元件,包括TC-rich repeats、S-box、HSE和W-box等;CfaSC2启动子-828 bp这一缺失体可以应答青枯病菌;应答MeJA和乙烯(ET)的元件可能位于CaSC2启动子-962 bp至-828 bp之间;-660 bp至-229 bp之间可能含有应答ABA、Ca WRKYK40和CaWRKYK6的顺式作用元件;CaSC2启动子各个5’缺失体都应答高温,但是在紫外线的处理下,除了全长不应答之外各个5’缺失体都应答。本研究结果有利用于阐明辣椒等茄科植物倍半萜植保素代谢调控机制。
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