背俞穴埋线干预慢性疲劳综合征大鼠的作用机制研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:gdmkhx
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目的:慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome, CFS)是以持续疲劳、活动减少为主要表现的全身性综合征,持续时间≥6个月,伴有咽喉痛、头痛、肌肉关节疼痛、淋巴结肿大和压痛、低热(或自觉发热)、睡眠障碍、记忆力差、抑郁以及多种神经精神症状,卧床休息不能缓解,而各项体格检查和实验室检查均无明显异常。但目前国内外对其病因病机尚未研究透彻,考虑可能与病毒感染、神经内分泌紊乱、自身免疫功能异常、遗传等因素有关。目前流行病学研究表明慢性疲劳综合征在人群中的患病率正在遂年增加。美国CDC预测CFS将成为21世纪影响人类健康的主要问题之一。CFS的高流行率给个人、家庭和社会带来不可低估的损害,已引起国内外医学界及社会的积极关注。性疲劳综合征在中医学中,应属于传统病名中的“虚劳”、“百合病”、“脏躁”、“郁证”等。慢性疲劳综合征在临床上最重要的表现形式是长时间的疲倦状态,这种疲倦即有生理上的也有精神上的,是多方面受累的综合性病证,从中医的角度来看,慢性疲劳综合征的病因可以归结于先天不足、作息失调、劳累过度、饮食不节、情志内伤等;而病机则是气耗过多、气机紊乱等引起脏腑功能异常、气化失司、经络不通,最终导致以脾肾两脏为主的多脏腑功能异常的病证。背俞穴固然可以调节相应的脏腑功能,但由于人体脏腑存在表里关系,相互间的经络紧密联系,表里脏腑之间的经脉相互络属,气血互相输注,所以对背俞穴进行治疗干预,一方面可以调节腧穴对应本脏的机能,另一方面也对互为表里的脏腑功能进行调节,增强人体本身存在的抗病能力和自身调节作用,增强人体的免疫功能,使机体脏腑阴阳恢复平和,最终起到治疗慢性疲劳综合征的作用。而穴位埋线疗法是指把一小段可以被人体吸收的缝合线埋植入穴位相应位置的皮肤下,这一缝合线在穴位的皮内可以起到对穴位的长期的连续的刺激效应,从而发挥穴位的特异性来治疗疾病。本研究采用动物实验的方法,对背俞穴埋线治疗慢性疲劳综合征大鼠的作用效应进行了探讨,希望找到其起效作用机制,并为临床推广使用本疗法提供理论依据。方法:采用3月龄SPF级SD大鼠40只,体重160-180g,雌雄各半,根据随机数字表法将大鼠随机分为空白组、模型组、穴位埋线组和药物组,每组雌雄大鼠各5只,共10只。适应2天后进行造模。除空白组不作造模处理外其余各组均采用慢性束缚法和强制冷水游泳法隔天交替进行制备CFS大鼠模型,规定单号日期进行束缚,双号日期进行冷水游泳,持续14天。空白组大鼠在同一环境中饲养,每日空抓1次,在其余各组造模期间空白组暂不予进食和进水。慢性束缚法:将需造模的三组大鼠均隔天束缚1次,每次束缚的时间不同,随机确定。束缚时,使大鼠钻进自制的束缚筒内,并调节到其不产生强烈反抗的紧张程度,平架在木板上。6分钟后取出。强制冷水游泳法:准备两个游泳池,规格为185cmx58cmx73cm,游泳时水深为50cm,水温为14±1℃,将同组雌雄大鼠同时分别置于两个游泳池中,8分钟后取出。游泳期间防止大鼠团抱自救或因力竭沉人水中。在每天造模处理后1h内开始进行治疗处理,每日1次,连续14天。空白组、模型组:不进行任何治疗处理。穴位埋线组选取以下处方:①第一组:肺俞,心俞;②第二组:肝俞,脾俞,肾俞。进行埋线治疗。埋线治疗隔天一次,两组穴位交替进行。药物组给予人参皂甙水溶液(70mg/kg/d)灌胃治疗,每只大鼠每天给予7mg/100g人参皂甙水溶液的标准给药灌胃治疗。两组治疗均连续14天,每次治疗在造模处理后1h进行。每天对大鼠一般情况进行观察,包括饮水量、进食量、体重以及大鼠粪便情况、鼠毛色泽和眯眼、耳廓色泽、尾部粗细和色泽、休息时身体的姿势等。实验结束后检测行为学表现(旷场实验和悬吊实验),摘除动物的脾脏组织计算脾脏系数,采集血液分离血清后检测血清中的细胞因子IL-1β、IL-6的表达水平,摘除大脑组织检测大脑皮质BDNF和NGF表达水平。结果:1.造模前,各组大鼠的一般情况等均无明显差异。随着造模时间的推移,空白组大鼠神态安静,时而活泼好动,皮毛光洁整齐,眼睛有神;模型组大鼠饮水量、进食量略有减少,精神倦怠,皮毛失去光泽、稀疏,眼神黯淡无光,体型瘦弱,活动减少,眯眼明显,粪便稀,爱扎堆,反应力明显降低。治疗组大鼠精神尚可,饮水、进食量较模型组增多,毛色、活动、粪便等较空白组无明显差异。2.造模第1天,各组大鼠体重无明显差异。造模、治疗结束后,模型组大鼠明显消瘦,体重增加不明显,与空白组比较,统计学具有显著性差异(P<0.01);穴位埋线组和药物组大鼠体重增加较模型组明显,统计学具有显著性差异(P<0.01),说明模型大鼠体重由于慢性复合应激而致增长缓慢。无论是穴位埋线五脏背俞穴治疗还是灌胃人参皂甙水溶液治疗,都可以减缓慢性疲劳综合征模型大鼠的疲劳状态,以及改善其体重增长缓慢的表现。3.造模、治疗结束后,模型组与空白组比较,大鼠水平运动次数和垂直运动次数均明显减少,差异具有显著性统计学意义(P<0.01);与模型组比较,穴位埋线组和药物组大鼠水平、垂直活动次数均增加,差异均具有统计学意义(P<0.05),说明模型大鼠在新环境的探究行为减少、情绪抑郁,具有躯体和心理的疲劳,穴位埋线“背俞穴”及人参皂甙治疗对其具有明显的调节作用。4.模型组大鼠悬尾后挣扎次数明显减少,不动时间明显长于其它组别,与空白组比较,具有显著性统计学意义(P<0.01);与模型组比较,穴位埋线组和药物组不动时间有所减少,具有统计学意义(P<0.05),说明慢性复合应激所致的疲劳大鼠体力明显下降,活动易出现疲劳,有“抑郁”情绪倾向,穴位埋线“背俞穴”及人参皂甙治疗对其具有一定的改善作用。穴位埋线组与药物组实验大鼠经过穴位埋线五脏背俞穴和灌服人参皂甙水溶液的治疗干预后,都可以明显改善模型大鼠的行为学测试,可以对模型大鼠生理和心理上的疲劳状态产生治疗效应。5.与空白组比较,模型组大鼠脾脏系数降低,具有显著性统计学意义(P<0.01);经穴位埋线“背俞穴”、人参皂甙治疗后脾脏系数升高,与模型组比较均具有统计学意义(P<0.05),其中穴位埋线组脾脏系数升高明显(P<0.01),表明穴位埋线改善慢性疲劳综合征模型大鼠的脾脏系数和药物人参皂甙具有相似的效应。6.与空白组比较,模型组IL-1β、IL-6含量升高,差异具有显著性统计学意义(P<0.01);与模型组比较,穴位埋线组、药物组IL-1 β、IL-6水平下降,差异均具有统计学意义(P<0.05),其中1L-1β、IL-6的含量,穴位埋线组的降幅较大(P<0.01),两种治疗方法都能减缓模型大鼠体内的炎症反应,增加机体免疫抵抗力,从而治疗慢性疲劳综合征。7.与空白组比较,模型组的光密度和阳性面积都明显要小,差异具有统计学意义,说明模型组大脑皮质的BDNF、NGF表达水平明显低于空白组。而穴位埋线组和药物组的BDNF、NGF光密度和阳性面积则明显要比模型组高,差异有统计学意义,两种治疗方法都能改善神经元损伤,并促进大脑神经元结构和功能的恢复,从而治疗慢性疲劳综合征。结论:慢性疲劳综合征的发病最重要的是先天与后天之本的脾肾两脏的亏虚,从而引起五脏皆损,五脏功能紊乱。所以治疗当以调整机体气血、补益脏腑功能为大法。本次实验,在治疗干预上我们选取了五脏背俞穴(即肺俞、脾俞、心俞、肝俞和肾俞)作为埋线的穴位处方。选取五脏背俞穴进行穴位埋线对慢性疲劳综合征大鼠进行干预,可以减缓模型大鼠的各种疲劳症状和体重增加缓慢的情况,并改善其行为学表现,增加体能和纠正其抑郁消极的情绪。其内在机制可能是背俞穴穴位埋线可以提高模型大鼠的脾脏系数,增加其自身免疫能力,提高脑组织内的神经营养因子含量,从整体水平上改善心理-神经-免疫调节系统,从而治疗慢性疲劳综合征。穴位埋线的作用效应与药物人参皂甙相似。
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