研究背景：近年来，炎性损伤机制在脑缺血/再灌注损伤中的作用日益受到人们重视，核因子-κB（NF-κB）激活被认为是介导脑缺血/再灌注后炎性反应的中心环节，但核因子-κB激活对脑缺血起保护还是损伤作用，目前认识不一，因此本研究采用NF-κB活化的阻断剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）抑制NF-κB在脑缺血后的活化，观察其可能的作用，从而为进一步在核转录水平探讨电刺激小脑顶核（FNS）抗局灶脑缺血/再灌注后炎性损伤机制奠定基础。近年研究证实，FNS具有确切的脑保护作用和抗炎效果。迄今，国内外尚无有关FNS对NF-κB在脑缺血后的活化有无直接调控作用的报道,从核转录水平来探讨FNS脑保护作用机理也较少涉及。基于FNS原理研制的脑循环功能治疗仪，采用经皮电刺激小脑顶核（类似于电刺激中医的“完骨”穴区）的方式对多种脑部疾病都产生了比较肯定的临床疗效。但目前国内外有关经皮电刺激小脑顶核（percutaneous FNS）的临床疗效是否是通过小脑顶核来发挥作用这方面的基础研究甚少，通过研究“完骨”穴针刺效应的产生<WP=8>与小脑顶核的关系，有助于阐明临床经皮电刺激小脑顶核的作用机理。目的：（1）研究NF-κB在大鼠局灶脑缺血/再灌注后的表达、活化及其DNA结合活性变化的动态规律，借助NF-κB活化的阻断剂PDTC阻断NF-κB在局灶脑缺血/再灌注后的活化，以进一步证实NF-κB的活化对脑缺血是起保护还是损伤作用,从而为进一步在核转录水平探讨FNS抗局灶脑缺血/再灌注后炎性损伤的机理奠定基础；（2）从核转录水平探讨FNS抗局灶脑缺血/再灌注后炎性损伤的机理；（3）从核转录水平探索性研究电针“完骨”穴（EA）对局灶脑缺血/再灌注后炎性损伤的调控作用以及这种针刺效应的产生与小脑顶核的关系；从而进一步阐明临床经皮电刺激小脑顶核的作用机理。方法：采用正常和毁损小脑顶核的成年雄性Wistar大鼠用线栓法制备局灶脑缺血/再灌注模型，以FNS、EA和静脉注射PDTC为干预治疗手段，以缺血大鼠神经症状学评分、脑组织缺血性改变（包括脑梗死体积、缺血侧皮质残存神经元百分比和脑组织缺血的病理改变）、NF-кB p65 mRNA和蛋白表达 、NF-кB 核转位现象、NF-κB的DNA结合活性、IL-1βmRNA表达等为主要观测指标，采用神经病理（TTC染色、尼氏染色及HE染色等）、免疫组化（原位观察NF-кB p65蛋白表达及NF-κB核转位现象）、EMSA(测定NF-κB DNA结合活性)、Western blot（检测NF-κB p65蛋白亚基表达）、原位杂交（检测NF-κB p65 mRNA表达）、RT-PCR（检测NF-κB调控的下游损伤因子IL-1β mRNA表达）等方法，从mRNA转录到蛋白质表达，从NF-κB核转位现象到总体活性等多层次、多角度来观察FNS、EA和静脉注射PDTC对局灶脑缺血/再灌注后脑内<WP=9>NF-κB生物学行为的影响。结果：1．NC组 正常大鼠脑组织中，NF-κB p65、IL-1β mRNA表达较弱，可见少量NF-κB发生核转位，脑组织核蛋白中NF-κB p65蛋白含量较少，NF-κB DNA结合活性较低。2．I/R组 MCAO（大脑中动脉闭塞）大鼠缺血2h，再灌注（R）后3h、6h、12h和24h，缺血脑组织中NF-κB p65 mRNA表达水平均高于正常组（P＜0.05）；R3h～R12h呈持续高表达状态，R24h其表达明显降低（p＜0.05）；NF-κB p65 mRNA阳性细胞主要分布在缺血半球，尤其病灶周围；NF-κB核转位细胞各时点均比正常组增加（R6h、R12h与正常组差异显著， P＜0.05）；R3h～R12h随再灌注时间延长逐渐增加，R12h达高峰（P＜0.05），R24h明显减少（与R6h、R12h的差异P＜0.05），趋于R3h的水平（P＞0.05）；核转位细胞主要分布在缺血病灶周围、海马和基底节等；缺血脑组织核蛋白中NF-κB p65蛋白含量各时点均较正常组增加（R6h、R12h与正常组的差异 P＜0.05）；其动态变化趋势与NF-κB核转位细胞相似，R12h含量最高（P＜0.05）；缺血脑组织核蛋白中NF-κB DNA结合活性各时点均较正常组增加（除R3h P＞0.05，其余时点P＜0.05）；R3h～R12h随再灌注时间延长逐渐增加，R12h达高峰（P＜0.05），R24h明显下降，接近R6h的水平（与R12h比P＜0.05，与R6h比P＞0.05）。缺血脑组织中IL-1β mRNA的表达水平各时点均显著高于正常水平（P＜0.05）；R3h～R12h随再灌注时间延长逐渐增加，R12h达高峰（P＜0.05），R24h下降，明显低于R12h和R6h（P＜0.05）。3．I/R+PDTC组 MCAO大鼠缺血2h期间静脉滴注PDTC以后，再灌注（R）后3h、6h、12h和24h神经症状学评分均比I/对应组<WP=10>减少，R6h和R12h与对照组差异显著（x2=5.139，p=0.0144）；脑梗死体积明显比I/R对应组缩小；脑组织缺血性病理改变较对照组减轻，缺血侧皮质神经元残存百分比明显比对照组高（P＜0.05）；脑组织中NF-κB核转位细胞R3h和R24h趋于正常水平（P＞0.05），R6h和R12h均比正常组明显增加（P＜0.05）；R3h～R12h随再灌注时间延长逐渐增加（各时点间差异显著，P＜0.05），R12h达高峰，R24h明显减少（与R6h和R12h比P＜0.05）；各时点均比I/R对应组有不同程度减少，R6h、R12h与对照组差异显著（P＜0.05）；缺血脑组织核蛋白中NF-κB p65蛋白含量R3h和R24h略低于正常水平（P＞0.05），R6h和R12h比正常组?