大蒜素及茜草素抗鸽毛滴虫药效测定与初步应用

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鸽毛滴虫病是鸽的一种常见的寄生虫病,它是由鸽毛滴虫引起的一种多发性传染性原虫病。病鸽通常表现为消化道病变,其主要特征是在口腔、嗉囊、食道等部位出现坏死性溃疡,常因消化道和呼吸道阻塞,妨碍进食以及正常呼吸而引起鸽子死亡。随着我国肉鸽行业消费量的增加,肉鸽养殖数量也在逐年上升,这使得养鸽业得到了巨大的发展。但由于饲养方式的不合理、养殖技术的不足等因素,鸽群中毛滴虫的发病率以及幼鸽死亡率呈现出上升趋势。因此,抗鸽毛滴虫的药物使用较为频繁。目前,临床上常用的治疗鸽毛滴虫的化学药物有替硝唑、甲硝唑等,虽然甲硝唑具有十分显著的杀毛滴虫的效果,但鸽毛滴虫的抗药性已显著增加,用甲硝唑治疗鸽毛滴虫感染的病鸽的治愈率也在逐渐下降,并且复发率也有一定的提高;另一方面,长期使用甲硝唑不仅有较大副作用,而且还具有致癌和致人基因突变的潜在危险。因此探索一条新的治疗方法迫在眉睫。虽然中草药没有一些西药见效快,但是由于中草药都是天然和毒副作用小的药物,因此,中草药越来越受到人们的青睐。基于以上分析,本试验拟研究两种中草药提取物对鸽毛滴虫药效观察,为大蒜—茜草提取物抗鸽毛滴虫提供科学依据。试验Ⅰ 大蒜素、茜草素对鸽毛滴虫形态学影响观察观察并探讨大蒜素、茜草素对鸽毛滴虫培养过程中形态学的变化。方法配制培养鸽毛滴虫的肝浸汤培养液,从鸽毛滴虫感染病鸽体内采集和培养鸽毛滴虫。待虫体培养后24h,将鸽毛滴虫纯化,使得虫体浓度大于1 ×105个/ml。然后将其分别入含有1mg/ml大蒜素、1.5mg/ml茜草素和不加药对照组的培养基中,置于37℃恒温箱中培养,分别在0.5h、2h、4h进行虫体收集,置光学显微镜1000×观察虫体形态学变化情况。同时制备不同时间段的扫描电子显微镜样品,置扫描电镜下观察鸽毛滴虫活力及形态变化,记录结果,并进行分析。结果光镜检查,用药组鸽毛滴虫大多数在大蒜素、茜草素给药后0.5h活力开始减弱,2h后虫体鞭毛紧附在虫体表,药物作用4h后虫体内出现折光性强的空泡,随后死亡。扫描电镜观察,当药物作用0.5h时,虫体表面变得凹凸不平,出现许多褶皱,2h后虫体表面出现凹陷,虫体鞭毛紧紧依附在虫体表面,药物作用4h虫体表面皱缩变形,凹陷加深,形成大而深的空洞,有的虫体开始裂解,随后虫体的颗粒状内容物外泄、死亡。试验Ⅱ 大蒜素在动物体内药动学测定以大蒜素为研究对象,测定其在鸽体内药代动力学。方法将试验鸽大蒜素溶液口服给药后,用高效液相色谱测定24h大蒜素在试验动物鸽体内的血药浓度。结果大蒜素通过口服进入鸽血液中,仅能测到0.08h、0.25h、0.5h数据,其余由于低于最低检测浓度而无法测得。试验Ⅲ大蒜素及茜草素抗鸽毛滴虫药效测定观察大蒜素及茜草素体外抗鸽毛滴虫效果以及初步应用。方法用肝浸汤培养基将大蒜素、茜草素以及大蒜素与茜草素混合配制成不同药物浓度的培养液,对鸽毛滴虫进行体外培养,分别在2h、4h、8h、12h、24h进行毛滴虫存活状态的观察,计算虫体的死亡率。将200只感染毛滴虫鸽随机分成4组,大蒜素、茜草素混合液设低、中、高三个浓度组和空白组,连续5天灌喂。结果大蒜素在体外对鸽毛滴虫具有抑制和杀灭作用,100%杀虫的最低药物浓度为0.5mg/ml,当药物浓度高于此浓度时,随着浓度的增加,各实验组100%鸽毛滴虫死亡率时间也随之缩短,2mg/ml实验组4h杀虫率就达100%,与空白对照组比较差别有显著性(P<0.05)。茜草素在体外对鸽毛滴虫也具有抑制和杀灭作用,100%杀虫的最低药物浓度为0.75mg/ml,随着药物浓度的增加,各实验组100%鸽毛滴虫死亡率时间也随之缩短,3mg/ml实验组4h杀虫率就达100%,与空白对照组比较差别有显著性(P<0.05)。初步应用中高浓度组、中浓度组治愈率高达90%以上,而低浓度组治愈率为64%,空白组治愈率为0。
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