【摘 要】
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桫椤[Alsophila spinulosa(wall.ex Hook.)Tryon.]是现存唯一的木本蕨类植物,是国家一级保护植物,同时又是我国南方的传统中药材。桫椤茎干入药,有祛风湿、强筋骨、清热止咳等功效;常用于治疗跌打损伤、肺热咳嗽,预防流行性感冒、流脑以及胃炎、水肿、肾虚腰痛等;汁液外用可治癣症。有研究认为桫椤叶和茎干具有相似的化学成分,所以本研究以桫椤叶为研究对象,主要探究桫椤叶多酚提
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桫椤[Alsophila spinulosa(wall.ex Hook.)Tryon.]是现存唯一的木本蕨类植物,是国家一级保护植物,同时又是我国南方的传统中药材。桫椤茎干入药,有祛风湿、强筋骨、清热止咳等功效;常用于治疗跌打损伤、肺热咳嗽,预防流行性感冒、流脑以及胃炎、水肿、肾虚腰痛等;汁液外用可治癣症。有研究认为桫椤叶和茎干具有相似的化学成分,所以本研究以桫椤叶为研究对象,主要探究桫椤叶多酚提取分离纯化工艺及评价其体外抗氧化活性,通过秀丽隐杆线虫模型探究桫椤叶多酚对阿尔茨海默症(AD)的改善及作用机制,为桫椤叶的利用及开发提供依据。取得的结果如下:(1)根据单因素实验结果,使用响应面优化超声波辅助提取的工艺条件,得到最佳工艺条件为:超声波功率为240 W,料液比为1:25.00 g/mL,乙醇浓度为40.00%,提取时间为20.00 min。在此条件下桫椤叶多酚实际得率为8.79%,与理论得率8.83%相近。(2)考察了7种大孔树脂对桫椤叶多酚粗提物吸附率和解吸率的影响,发现AB-8大孔树脂对桫椤叶多酚的纯化效果较好;进一步分析了其上样浓度、上样速度、洗脱剂浓度及洗脱速度对AB-8大孔树脂纯化桫椤叶多酚的影响。得出最佳纯化工艺条件为:上样浓度3 mg/mL,洗脱剂浓度70%,上样速度3 mL/min,洗脱速度2 mL/min。该工艺条件下纯化桫椤叶多酚后,多酚纯度由纯化前的17.34±0.05%,提升到纯化后的47.00±0.04%。(3)纯化后的桫椤叶多酚(ASP)具有较好的体外抗氧化活性。其DPPH自由基的IC50值为0.06 mg/mL,羟基自由基IC50值0.69 mg/mL,ABTS自由基IC50值0.05mg/mL,抗脂质氧化IC50值为1.99 mg/mL。(4)桫椤叶多酚(ASP)在秀丽隐杆线虫体内能够提高其抗热应激及抗氧化应激能力,降低温度诱导的瘫痪率;并能通过提高体内的SOD、CAT酶活力及降低体内膜脂过氧化的发生来减轻阿尔茨海默症症状。(5)桫椤叶多酚(ASP)通过上调skn-1基因表达量激活抗氧化防御系统来改善阿尔茨海默症;同时下调pdk-1、akt-1基因表达量激活PI3K/AKT信号通路缓解阿尔茨海默症。
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