鲍鱼脏器多糖提取工艺及重金属分布和去除研究

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鲍鱼脏器含有丰富的生物活性多糖,且大量的体内、体外实验表明多糖具有抗氧化、抗肿瘤等功能,具有开发成保健品的潜在价值。随着世界工业的发展,海洋重金属污染日趋加重,重金属和有毒有机化合物等有毒物质在海域中积累,并通过海洋生物的富集作用,重金属随着食物链逐级富积。鲍鱼生活在海洋中,以海水和藻类为食,其体内无疑聚集了大量的重金属。鲍鱼脏器多糖的提取与重金属在多糖中的分布和去除不仅是多糖实际生产中重要的内容,也是保证鲍鱼脏器多糖开发成保健品的前提条件。本文利用打浆离心得到的鲍鱼脏器多糖初液为原料,以酶解液中多糖含量及氨基态氮含量为指标,确定不同酶对多糖的提取效果并最佳酶解工艺条件;在多糖提取工艺研究过程中,研究各操作对重金属Cd、Pb、As蛋白质及多糖含量的影响,确定多糖提取的最佳工艺及重金属Cd、Pb、As的分布;采用板框联合树脂法除多糖中残余的重金属Cd、Pb、As;分别利用二次醇沉法、透析法、活性炭吸附法、高活性白土吸附法除重金属Hg。本文详细研究内容和结果如下:1、研究了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶类对鲍鱼脏器多糖(abalone viscera polysaccharide,AVP初液的水解效果,根据蛋白质水解率及酶解液中多糖含量,确定最佳酶类。结果表明木瓜蛋白酶对AVP初液中蛋白质的水解效果最佳,且水解后酶解液中氨基态氮含量可达11.7%,多糖含量达18.3%,同时说明了对多糖纯度提高具有一定的效果。2、根据选择出的最佳水解酶木瓜蛋白酶,研究其最佳酶解条件,结果表明当底物浓度为3%,pH=7.0,酶加量为4500U/g,温度为50℃,水解3h时,多糖含量及氨基态氮含量最多,即水解效果最好。3、多糖提取工艺及重金属分布的研究,分别对各步骤溶液中多糖、蛋白质及重金属进行检测和分析,结果表明:(1)Cd、Pb、As以与蛋白质结合态和游离态存在,且Cd、Pb的游离态不溶于乙醇,而As的游离态溶于乙醇;(2)重金属Hg分布于多糖中;(3)板框及树脂对AVP具有脱色、吸附重金属的作用;(4)板框具有吸附蛋白质的作用。4、采用板框联合树脂法去除多糖溶液中残留的重金属Cd、Pb、As,结果表明732型树脂可以有效去除重金属Pb、Cd,同时对蛋白质具有吸附作用;717型树脂可吸附重金属As,对Pb、Cd基本不起作用。最终得到的AVP样品中重金属含量均符合GB 16740-1997对个别产品中有害金属的限量要求。5、分别采用二次醇沉法、透析法、活性炭吸附法、高活性白土吸附法对醇沉后得到的鲍鱼多糖中Hg进行去除,结果表明高活性白土可有效去除重金属且增加多糖含量。6、根据AVP提取工艺及对重金属Cd、Pb、As、Hg去除的研究,确定最佳工艺为:内脏打浆——离心——多糖初液——酶解——离心——板框——醇沉——高活性白土处理——板框——离心,溶解——732阳离子树脂交换——717阴离子树脂交换——真空冷冻干燥。
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