【摘 要】
：
目的:通过对大鼠的大脑中动脉栓塞（MCAO）在体模型与大鼠海马脑片缺氧无糖损伤（OGD）离体模型进行研究,探讨异氟烷后处理通过Activin A/P38/MEF2D信号通路调控内质网应激减轻细胞凋亡在抗脑缺血再灌注损伤中改善大鼠行为学功能的作用,接着探讨Activin A/P38/MEF2D信号通路中MEF2D转录因子对信号通路的影响,以及MEF2D转录因子通过信号通路在大鼠海马组织中作用于内质网
论文部分内容阅读
目的:通过对大鼠的大脑中动脉栓塞（MCAO）在体模型与大鼠海马脑片缺氧无糖损伤（OGD）离体模型进行研究,探讨异氟烷后处理通过Activin A/P38/MEF2D信号通路调控内质网应激减轻细胞凋亡在抗脑缺血再灌注损伤中改善大鼠行为学功能的作用,接着探讨Activin A/P38/MEF2D信号通路中MEF2D转录因子对信号通路的影响,以及MEF2D转录因子通过信号通路在大鼠海马组织中作用于内质网应激从而影响细胞凋亡的作用。方法:在体实验部分,制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型后进行再灌注,24h后取脑,异氟烷后处理组于再灌注时立即使用异氟烷后处理。大鼠的行为学评估在建模24h、3d、5d后进行。离体实验采用新生2周SD大鼠,制备海马脑片。使用TTC染色观察在体模型各组大鼠脑梗死体积的差别并进行分析,采用TUNEL染色,观察大鼠海马CA1区细胞的凋亡情况,使用透射电镜观察离体各组大鼠内质网的变化,观察在体离体各组大鼠海马区凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase3的表达情况,运用Western blot以及免疫荧光检测内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、ATF6、Caspase12的表达量。接着观察大鼠海马CA1区关键因子Activin A、MEF2D、P38、p-P38的蛋白表达。在体模型建模前21d,进行海马区微量注射腺病毒,离体模型则于术前2周SD大鼠P0进行注射,敲低MEF2D的表达。分别制备在体离体脑缺血再灌注模型后,使用TTC染色观察在体模型大鼠脑梗死体积的差别,采用TUNEL染色,观察海马CA1区细胞的凋亡情况,使用透射电镜观察离体各组大鼠内质网的变化,运用Western blot检测各组大鼠海马区凋亡相关蛋白的表达情况,运用Western blot以及免疫荧光检测内质网应激相关蛋白的表达。接着在体离体模型分别使用通路抑制剂SB431542减少Activin A的表达,观察P38、p-P38、MEF2D的蛋白表达,抑制MEF2D的表达,观察Activin A、P38、p-P38、MEF2D的蛋白表达,从而明确通路分子之间的调控关系。结果:（1）与Sham组相比,MCAO/R组神经行为学评分更高,脑梗死体积更大,海马CA1区神经细胞凋亡数量更高（P<0.001）,MCAO/R组与OGD/R组凋亡相关蛋白Bax、Caspase3表达量明显更高（P<0.001）,Bcl-2更低（P<0.001）。内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、ATF6、Caspase12表达量明显更高（P<0.001）。ISO组较MCAO/R神经行为学评分较低,脑梗死体积较小,海马CA1区神经细胞凋亡数量较少（P<0.001）,MCAO/R组与OGD/R组凋亡相关蛋白Bax、Caspase3表达量明显更少（P<0.001）,Bcl-2更多（P<0.001）。内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、ATF6、Caspase12表达量明显更少（P<0.001）。（2）与MCAO/R组相比,AAV-MEF2D-sh RNA组神经行为学评分更高,脑梗死体积更大,海马CA1区神经细胞凋亡数量更高、尼氏小体数量更少（P<0.001）,在体与离体AAV-MEF2D-sh RNA组促凋亡蛋白表达明显更高（P<0.001）,保护性蛋白表达更低（P<0.001）。内质网应激相关蛋白明显更高（P<0.001）。AAV-MEF2D-NC组与ISO组无统计学意义（P>0.5）。（3）单独应用Activin A通路抑制剂后,p-P38、MEF2D表达减少（P<0.001）,应用腺病毒敲低MEF2D表达水平之后,每组Activin A,P38、p-P38的表达变化无统计学意义（P>0.05）。结论:（1）MEF2D可靶向调控Activin A/P38/MEF2D信号通路减轻内质网应激从而减轻细胞凋亡,改善大鼠行为学功能。（2）证明异氟烷后处理可以通过调控MEF2D转录因子进一步影响Activin A/P38/MEF2D信号通路减轻内质网应激产生脑保护作用。
其他文献
我国是一个典型的高度近视高发国家,且呈现低龄化趋势。高度近视对视功能损害严重,已成为我国主要的致盲性眼病之一,但目前缺乏有效的治疗手段。巩膜交联术有望成为具有临床应用前景的治疗高度近视的方法,药物离子导入法因其无创性被引入交联术中,旨在利用小电流增强分子对组织的渗透,提高交联术的疗效。但是影响离子导入的因素很多,如电流时间、电流强度及寄生离子等。其中寄生离子和导入时间对该术式在巩膜应用中的影响尚不
【目的】新疆地理位置独特,设施番茄及露地加工番茄产业优势明显。由于新疆特殊的气候条件和地理格局,土壤次生盐渍化和盐碱危害已成为番茄产业可持续发展的一大障碍。品种是番茄生产的核心,通过不断改良、更新及优化品种是发展番茄生产最为经济有效的措施。因此,对收集的番茄种质资源进行综合性状及耐盐性评价,可为培育优质抗逆新品种提供育种材料资源和提供理论依据。也将为发展壮大新疆的特色产业提供种质支持和保障。【方法
我国是世界上葡萄与葡萄酒生产大国,其中鲜食葡萄面积、产量均居世界第一位。2019年在新疆葡萄上发现一种新病害,其主要在葡萄成熟期危害果实,并在病部产生灰绿色霉层,严重影响葡萄产量和品质。目前,国内外对该病害的研究较少且在新疆尚未见报道。因此,本研究对该病害病原种类进行了鉴定,并对病原菌的生物学特性进行了研究,在此基础上,对4种杀菌剂原药和5种制剂进行室内毒力测定、离体果粒防效试验及田间药效试验,以
我国处理棉花秸秆主要采用秸秆沤制和就地焚烧的方式,存在效率低、劳动力大、成本高、严重污染环境等问题,秸秆粉碎还田机可以有效解决此类问题。现有的秸秆粉碎还田机存在稳定性差、粉碎质量不佳等问题。针对以上问题,设计了一种适用于新疆机采棉种植模式的立式秸秆粉碎还田机,本文主要是对其机架和粉碎装置的研究。设计了机架结构,为了避免共振发生,对机架进行了有限元和试验模态分析,完成了对机架的优化改进;设计了粉碎装
量化设施樱桃番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）生长发育与养分吸收之间的关系,建立樱桃番茄生长发育和养分吸收模型,对实现我国设施无土栽培樱桃番茄智能化生产,提高樱桃番茄的生产效益具有重要意义。本研究于2018-2020年,在石河子大学农学院的日光温室开展试验,根据无土栽培樱桃番茄的生长发育动态过程,构建了基于干物质积累的樱桃番茄养分吸收模型,以期为樱桃番茄养分实时监控
目的:检测新疆哈萨克族原发性高血压患者单个核细胞中CUL3（Cullin3）m RNA及蛋白的表达水平,探讨其与新疆哈萨克族人群原发性高血压的相关性。方法:2018年9月至2018年11月在新疆玛纳斯县旱卡子滩乡开展流行病学调查,建立高血压数据库,病例组（高血压组）为随机入选的24名哈族原发性高血压患者,对照组为24名同民族健康人员。测量体重、血压、身高,检测甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、
【目的】棉花（Gossypium hirsutum L.）是世界性的主要经济作物,也是纺织行业最重要的天然纤维来源,其品质的好坏直接决定纺织企业的效益和织物的质量。然而,原棉在生产、加工和储存过程中易发生黄化和强力下降等老化问题,影响后续纺织和出售。由于棉纤维品质很大程度上取决于品种的遗传特性,因此通过基因改良品种性状为减轻纤维黄化问题提供了可能。本研究旨在研究老化对棉纤维黄度、强度等品质性状的影
目的:甲状腺癌是临床上常见的一种恶性肿瘤,影响着患者的生命健康,通过研究甲状腺癌的分子水平特征,研究其发病机制并找到有效的治疗方法是具有重要意义的。因此,本研究通过检测甲状腺癌的癌组织及癌旁甲状腺组织中钠碘同向转运体（sodium iodide symporter,NIS）蛋白的含量,明确NIS蛋白的表达与甲状腺癌的相关性,为临床上甲状腺癌的治疗、预后提供一个理论依据和指导。方法:选取在我院201
目的:检测新疆石河子地区绝经后2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）女性RANK蛋白水平及RANK、RANKL基因位点多态性,探讨其与骨代谢指标和骨密度（Bone mineral density,BMD）的关系,为石河子地区绝经后女性T2DM合并骨质疏松（Osteoporosis,OP）的防治提供依据。方法:1.纳入200例石河子地区绝经后女性为研究对象,根据口服
目的初步探究大鼠在体实验中,革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌所致脓毒症诱导的心肌损伤相关指标的变化及其区别,为早期鉴别脓毒症病原体提供一定的实验基础。方法（1）雄性SD大鼠105只,随机分为生理盐水（NC）组革兰氏阳性细菌脓毒症（SA）组、革兰氏阴性细菌脓毒症（EC）组,SA组:腹腔注射3ml热灭活金黄色葡萄球菌;EC组:腹腔注射3ml热灭活大肠埃希菌,NC组腹腔注射等量生理盐水。根据菌种浓度将SA及E