刺激性和抑制性信号之间的平衡调节着固有免疫的激活。信号调节蛋SIRPα与其配体CD47的相互作用,提供一个“别吃我”的信号给巨噬细胞。这对于自身的造血细胞免受吞噬是必须,物种间CD47具有不相容性,物种间CD47的不相容性在巨噬细胞介导的造血细胞异种移植排斥中发挥着重要的作用,CD47基因敲除小鼠造血细胞移植到野生型小鼠会被受体小鼠巨噬细胞迅速的清除,但CD47的不相容性对于非造血细胞移植排斥是否也发挥着关键性的作用尚不清楚,我们使用CD47基因敲除小鼠肝脏细胞移植模型来模拟异种移植CD47的不相容性,为了能够追踪移植入的肝脏细胞,我们使用绿色荧光素(GFP)转基因的野生型或CD47基因敲除小鼠作为肝脏细胞供体,GFP转基因野生型或CD47基因敲除小鼠肝脏使用两部酶消化法分离获取肝脏细胞。获取的肝脏细胞显微镜下观察确定存活率超过90%,然后将分离的野生型或者CD47基因敲除小鼠肝脏细胞经脾脏注射到野生型小鼠体内,设立未进行细胞移植的对照组。不同时间点采集外周血进行流式细胞分析,并且在相应时间点获取脾脏及肝脏行组织学检查。实验结果显示,与未进行细胞移植的假手术组比较,在肝脏细胞移植早期(第3天及第5天),CD47基因敲除小鼠肝脏细胞的移植而不是野生型小鼠肝脏细胞的移植协同受体小鼠肝脏的部分切除诱导了迅速的Mac-1+细胞的扩增和激活(例如,Mac-1+CD14+和Mac-1+CD16/32high)。另外,结果显示,接受CD47基因敲除小鼠肝脏细胞移植受体小鼠血清中AST,ALT水平显著高于接受野生型小鼠肝脏细胞移植的受体小鼠。这提示CD47基因敲除小鼠的移植的肝脏细胞比较野生型小鼠的肝脏细胞遭受了更加严重广泛的破坏。而且,我们通过组织学观察到野生型肝脏细胞移植到受体鼠体内能够长期的存活,而CD47基因敲除鼠肝脏细胞在肝脏细胞移植后7天脾脏组织切片中即仅能观察到少量的GFP阳性残留,在肝脏细胞移植后2周脾脏组织切片中各视野均不能观察到GFP阳性细胞存在,提示CD47基因敲除肝脏细胞在移植术后两周内被完全排斥,上述结果表明供体肝脏细胞缺乏CD47表达能够诱导快速的固有免疫细胞的激活,并介导了移植物的迅速排斥。为进一步研究同源同种的肝脏细胞移植中,供体CD47缺乏在获得性免疫如调节性T细胞激活中是否也发挥着重要作用,我们使用OVA转基因野生型或CD47基因敲除小鼠作为肝脏细胞的供体,通过肝脏细胞移植后受体小鼠对于OVA特异性免疫反应来解决此问题。受体小鼠接受来源于OVA转基因的野生型或CD47基因敲除小鼠肝脏细胞移植,肝脏细胞移植术后7天受体小鼠接受OVA转基因小鼠的皮肤移植,设立假手术组作为对照。与假手术组比较,脾脏内注射OVA转基因CD47基因敲除小鼠肝脏细胞显著的加速了7天后移植皮肤的排斥,与此截然不同的是,接受OVA转基因野生型小鼠肝脏细胞移植显著的延长了受体鼠移植皮肤的排斥,部分受体鼠移植的皮肤甚至达到了无限期的存活,组织学检查发现,OVA转基因野生型小鼠肝脏细胞移植受体小鼠的移植皮肤未见明显的炎性细胞的浸润,而OVA转基因CD47基因敲除小鼠肝脏细胞受体小鼠的移植皮肤HE染色示大量炎性细胞浸润,IHC显示OVA转基因CD47基因敲除小鼠肝脏细胞受体鼠的移植皮肤存在大量的CD4和CD8 T淋巴细胞浸润,而接受OVA转基因野生型小鼠移植受体小鼠的移植皮肤未见明显淋巴细胞浸润。与假手术相比较,接受OVA转基因CD47基因敲除肝脏细胞移植鼠的T淋巴细胞显示显著增强的对于OVA转基因小鼠细胞的刺激反应,表现为显著的淋巴细胞的增值。而OVA转基因野生型小鼠肝脏细胞受体小鼠淋巴细胞接受OVA转基因小鼠细胞刺激无明显增值反应。与野生型肝脏细胞受体鼠产生较高水平的耐受原性细胞因子IL-4和IL-10不同,CD47基因敲除小鼠肝脏细胞受体鼠产生较高水平的炎性细胞因子IFN-γ和IL-1α。并且我们发现在CD47正常肝脏细胞移植受体鼠髓系衍生的抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)显著的扩增了,使用吉非他滨能够有效的清除小鼠体内的MDSCs,吉非他滨处理小鼠接受OVA转基因野生型肝脏细胞脾脏内注射不能诱导OVA特异性的免疫耐受。因此MDSC的扩增对于这些鼠的耐受诱导是必须的。综上,我们目前的结果显示,供体的CD47不仅对于肝脏细胞移植后固有免疫细胞激活至关重要,它同样在肝脏细胞移植后控制T细胞同种异体移植反应以及耐受诱导中发挥着重要的作用。对CD47分子的进一步研究和理解可能为异种肝脏细胞移植以及其它异种细胞及器官移植提供一个新的研究方向和领域。对CD47的操控可能显著的改善异种移植的成功率。CD47可能成为新的治疗靶点,让异种移植向更广泛临床应用更进一步。我们的资料同时提示经脾脏内的肝脏细胞移植可能提供一个诱导免疫耐受的有效途径。