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第一部分慢性社会挫败应激对小鼠前额皮层miRNAs及P-catenin蛋白表达水平的影响目的：建立小鼠慢性社会挫败应激模型,检测前额皮层区小RNA (microRNA, miRNA)的差异化表达及蛋白表达变化。方法：采用慢性社会挫败应激和慢性不可预知性应激建立抑郁症模型；糖水偏好测试,悬尾测试和社会接触测试等检测抑郁样行为；Elisa检测模型小鼠血清皮质酮水平；实时荧光定量PCR定量分析前额皮层区miRNAs的差异表达；Western Blotting检测前额皮层区p-连环素(β-catenin)的表达。结果：(1)慢性社会挫败应激模型鼠前额皮层miR-214-3p表达相对于对照组上调4.249±0.816,miR-690相对于在对照组上调2.527±0.292；(2)慢性社会挫败应激模型小鼠的糖水偏好率下降到40.577±4.81%,社会接触时间缩短至60.85±13.17s；(3)慢性社会挫败应激模型小鼠血清皮质酮含量升高到17.943±0.86μg/L；(4)慢性社会挫败应激和慢性不可预知性应激模型鼠前额皮层β-catenin表达相对于对照组降低至54.7±11.2%。结论：慢性社会挫败应激模型小鼠均可作为抑郁症研究的理想模型,前额皮层区miR-214-3p表达上调,β-catenin表达降低。第二部分miR-214-3p和miR-690的作用靶点研究目的：明确miR-214-3p和miR-690以ctnnb1mRNA作为靶点。方法：采用实时荧光定量PCR的方法检测miR-214-3p和miR-690的表达水平；Western Blotting检测前额皮层区β-catenin的表达；双荧光素酶酶报告系统检测miR-690与ctnnb1mRNA的3’-UTR序列的结合位点。结果：(1)神经元转染miR-690的模拟物后miR-690的表达量相对于对照增加44.2±0.44；(2)神经元转染miR-690的模拟物后β-catenin蛋白表达水平相对于对照组降低到60±12%；(3)双荧光素酶报告实验证明miR-690以ctnnbl的3’UTR区作为靶点；(4)第三脑室在体注射miR-214-3p和miR-690的模拟物后相对于对照组miR-214-3p的表达增加到2.465±0.032,miR-690的表达增加到1.21±0.05；(5)第三脑室在体注射miR-214-3p模拟物后,相对于对照组降低β-catenin蛋白表达至64.6±4.35,而注射miR-690不影响β-catenin蛋白表达；(6)在体沉默ctnnbl区的3’UTR区相对于对照组可以有效降低mRNA的表达至0.37±0.07,同时降低P-catenin蛋白的表达量至24±3.5%。结论：miR-214-3p以ctnnb1的3’-UTR区为靶点调控β-catenin蛋白表达。第三部分调控前额皮层区miR-214-3p表达对慢性社会挫败应激所致小鼠抑郁样行为的影响及机制目的：研究调控前额皮层区miRNA-214-3p对小鼠抑郁样行为的影响及机制。方法：糖水偏好测试,悬尾测试和社会接触测试检测小鼠抑郁样行为的改变；实时荧光定量PCR分析前额皮层区miR-214-3p的表达；Western Blotting检测前额皮层区β-catenin的表达；脑片钳记录前额皮层区的微小兴奋性突触后电流(miniature excitatory postsynaptic current, mEPSC)。结果：(1)相对于对照组,antagomir-214明显降低miR-214-3p表达至1.046±0.05,增加β-catenin蛋白表达至91.3±4.7%；(2)antagomir-214明显降低模型小鼠悬尾不动时间至27.954±4.06s,并增加社会接触时间至64.283±10.7s；(3)antagomir-214能增加模型小鼠前额皮层区mEPSC幅度；(4)慢病毒包被miR-214-3p抑制物(lentivirus-miR-214, LV-miR-214)明显降低miR-214-3p表达水平至1.013±0.046,增加β-catenin蛋白表达至227±59.8%；(5)LV-miR-214降低模型小鼠悬尾不动时间至45.7±12.08,并增加社会接触时间至53.6±10.051s；(6)过表达ctnnb1降低模型小鼠悬尾不动时间至37.5±6.91s,并增加社会接触时间至46.833±6.921s；(7)与对照组相比,经鼻腔给予antagomir-214降低miR-214-3p表达至0.4±0.1,增加β-catenin蛋白表达至110±9.3%；(8)经鼻腔给予antagomir-214降低模型小鼠悬尾不动时间至67.83±14.35s,增加社会接触时间至50.55±7.44s；(9)antagomir-214, LV-miR-214和过表达ctnnbl均不影响模型小鼠的糖水偏好率。结论：抑制miR-214-3p表达可以逆转慢性社会挫败应激所致小鼠的抑郁样行为。