电化学生物传感器以其制备简单、特异性好及检测无需标记等优点引起了广泛关注。在这类传感器的构建中最为关键的一步是生物活性物质在电极表面的无损固定。本论文研究了电化学生物传感器在手性药物分析、免疫物质分析、酶催化分析等方面的应用。第一部分甲磺酸帕珠沙星分子印迹手性电容型传感器的研究将分子印迹技术与电化学传感器技术结合用于手性药物分析是当前研究的热点之一。但这类技术受到分子印迹聚合物制备困难及其电化学传感器不易制备等因素的影响，相应文献报道较为少见。本文采用分子印迹技术，以甲磺酸帕珠沙星手性药物（左旋PFM）为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，通过热自由基聚合了左旋PFM的分子印迹聚合物（MIP）。将MIP超声分散于氨基苯磺酸溶液中，通过在金电极表面电聚合氨基苯磺酸，掺杂固载MIP，然后用十二硫醇封闭电极表面使电极绝缘，构建了一种新型电容型传感器用于测定左旋PFM．。左旋PFM与MIP的特异性结合使电极的电容发生变化，电容变化与左旋PFM浓度在5.0 ng·mL^-1～5.0μg·mL^-1范围内呈良好线性关系，检出限为1.8 ng·mL^-1，相对标准偏差小于5.3％（n=7）。试验表明将MIP作为识别物质所制备的电容型传感器具有选择性好，灵敏度高，再生性能及稳定性能优良等特点。用于实际样品分析，其回收率在94.0～102.0％之间。第二部分电化学蛋白质生物传感器的研究生物传感器是分析生物技术的一个重要领域，也是典型的多学科交叉产物，其结合了生命科学、分析化学、物理学和信息科学及其相关技术。该技术应用广泛、相关研究在国内外报道较多。本论文对电化学的免疫传感器和酶传感器进行了系统研究。1．将甲胎蛋白抗体通过纳米金固定在聚氯乙烯（PVC）-邻苯二氨基体膜上。并用粘接剂将制得的膜固定在自制Ag-AgCl基体电极顶端，制备了电位型甲胎蛋白生物传感器并研究了电极性能。该电极对甲胎蛋白在4.9 ng·mL^-1～158.5ng·mL^-1范围内呈线性响应，相关系数0.9971，其检测限为1.6 ng·mL^-1。试验表明电极具有制备简单，灵敏度高，稳定性好，寿命长，选择性高等优点。用于患者的血清样品分析，获得较好的结果。2．通过Nafion和十二硫醇的甲醇混合液实现甲胎蛋白抗体在金电极上的固定，并用明胶修饰电极，制得电容型甲胎蛋白免疫传感器。先将金电极放入Nafion和十二硫醇的甲醇混合液，以修饰一层绝缘固定膜，再通过Nafion和抗体之间的静电相互作用实现抗体的固定，最后用1％的明胶加强抗体的固定。使用交流阻抗法研究了溶液pH值和离子强度对修饰层稳定性的影响。该电极在1.0 pg·mL^-1～100.0ng·mL^-1范围内对甲胎蛋白呈线性响应，其检测限为0.33 pg·mL^-1。研究结果表明，电极具有稳定性好、灵敏度高、响应快及选择性好等优点。3．制作了一种简便和高灵敏度的电容型免疫传感器，用于测定癌胚抗原。首先在金电极表面电聚合一层带负电的氨基苯磺酸，然后通过静电作用将癌胚抗原抗体固定在电极表面，再用十二硫醇封闭电极，制备成电容型癌胚抗原免疫电极。采用循环伏安法表征电极的修饰过程并用电化学阻抗仪测定电极电容变化。该电极对癌胚抗原在0.5pg·mL^-1～5ng·mL^-1范围内呈线性响应，相关系数0.9917，其检测限为0.16pg·mL^-1。4．采用两种成熟技术—酶标抗体技术和电位控制酶固定技术用于制备电流型免疫电极。首先将裸金电极在半胱氨酸中浸泡自组装半胱氨酸，再将制得的电极放入0.01mg·mL^-1。辣根过氧化物酶标记的乙型肝炎表面抗体（HBsAb）(0.01mol·L^-1PBS)中，控制电位组装30 min。通过循环伏安法、交流阻抗法和原予力显微镜对电极修饰过程进行表征。线性分为两段：128.0 pg·mL^-1～1.267 ng·mL（-1），2.532 ng·mL^-1～210.00 ng·mL^-1。从图中可以看出，检测下限为0.048 ng·mL^-1。5．通过控制电位技术将辣根过氧化物酶直接修饰到自组装有半胱氨酸的金电极表面，并采用原子力显微镜和循环伏安法进行表征。电极对过氧化氢有良好响应，线性范围为3.5×10^-9～3.7×10^-3mol·L^-1，下限1.2×10^-9 mol·L^-1．在25 s内达到95％稳态电流。该电极的RSD为3.1％，且可保存20天以上的工作寿命。常见干扰物对过氧化氢检测无明显影响。