植物乳杆菌抗菌作用及其应用初探

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利用乳酸菌发酵食品有着悠久的历史,经乳酸菌发酵加工后的食品不仅可以改善食品风味,提高营养价值,而且还具有特殊营养价值和生理活性。大量研究表明,乳酸菌可以调节机体胃肠道正常菌群,从而抑制肠道内腐败菌生长和腐败产物的产生;其产生的细菌素等代谢产物,还有抑制病菌生长等功效。因其具有高效、无毒、无残留、无抗药性等优势,应用到饲料中可有效改善肉质、提高饲料转化率。   本实验室筛选并分离出一株乳酸菌,对其的生理生化特征研究表明它与植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)最为相似,我们将其命名为Lactobacillus plantarum ZJ316。而产生的细菌素则命名为Plantaricin ZJ316。本文主要针对该细菌素的分离纯化及应用做了初步研究,内容包括:   植物乳杆菌ZJ316抑菌谱的测定。实验结果表明该菌株具有广谱抑菌性,后经双层平板拮抗法的测定,发现其还具有抗真菌的能力。   继而进行植物乳杆菌ZJ316细菌素的分离纯化。首先采用双水相萃取法进行初步分离,PEG/硫酸铵体系的最佳萃取条件是PEG4000浓度为17.5%、(NH4)2SO4浓度为19%、氯化钠浓度是1%,pH值为3.75,经实验验证,在此条件下萃取相的效价为:287.56IU/mL。PEG/硫酸钠双水相体系萃取细菌素的最佳实验条件是PEG分子量为1000,浓度为17%,硫酸钠的浓度为15%,氯化钠的浓度为1.0%,pH为3.5,经试验验证,在此条件下萃取相效价为:256IU/mL。   选择离子柱继续分离纯化。经试验确认,选取pH为5.0的醋酸钠缓冲液,DEAE Sepharose FF填料进行纯化分离,最终获得了较纯的细菌素组分。之后采用Trcine-SDS-PAGE电泳检测,根据电泳结果初步估计植物乳杆菌素ZJ316的分子量大约在6.5kDa左右,属于小分子多肽类物质。   初步探索植物乳杆菌ZJ316作为饲料添加剂应用于仔猪饲喂试验。结果表明:添加乳杆菌ZJ316饲喂的仔猪日增重、饲料转化率均有较明显提高;同时腹泻率和死亡率降低,可以起到替代抗生素的抑菌效果;其对猪肉品质也有一定的改善作用。通过石蜡切片对小肠绒毛形态变化的观察,可看出植物乳杆菌ZJ316对仔猪小肠有一定的影响,从而从生理学角度支持了实验组仔猪日增重、饲料转化率及肉品质均优于对照组的结论。
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