解淀粉芽胞杆菌在番茄上的定殖及拮抗青枯病的研究

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番茄青枯病是由番茄青枯菌引起的维管束病害,目前对该病的生物防治研究受到极大关注,成为热点。本论文从对生防菌的筛选,及其在番茄根部的定殖情况和其生防机制等方面进行研究。1.通过平板拮抗实验和盆栽试验筛选出对青枯菌拮抗效果较好的菌株X5和BQA2,通过生理生化实验,结合16SrDNA基因鉴定X5和BQA2为解淀粉芽胞杆菌。2.采用改良的海藻糖电转化法获得GFP标记菌株X5-GFP和BQA2-GFP,显微镜观察标记菌株在在土壤和水培中的番茄根际的定殖情况。实验结果表明:标记菌株单独或与青枯菌先后加入进行处理,番茄根际标记菌株的种群数量变化趋势都是一致的。在土壤番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为1.05×106 cfu/g;随之菌量逐渐下降;处理30 d后,为1.50×103 cfu/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为1.68×106 cfu/g;随之菌量也逐渐下降;处理30 d,为2.50×103 cfu/g;在水培番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为2.70×105cfu/g;随之菌量逐渐下降;处理30 d,为1.00X103cfu/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为3.60×105cfu/g;随之菌量同样逐渐下降;处理30 d,为1.50×103 cfu/g。结果表明解淀粉芽胞杆菌X5、BQA2都在番茄根际有较强的定殖能力。3.用氮肥、磷肥、钾肥、复合肥和标记菌株混合处理番茄苗,比较它们对标记菌株在番茄根部定殖的影响。结果发现:它们对X5-GFP和BQA2-GFP在番茄根部的定殖起促进作用。而这4个处理组之间相比,施加复合肥的效果相对较好。4.用标记菌株和青枯菌分别处理番茄苗,监测它们对番茄苗生长的影响。结果发现:标记菌株都对番茄植株和根部的生长起到促进作用,尤其对番茄苗新根的促生和植株鲜重的增加效果较为显著,而青枯菌却抑制番茄苗的生长。X5-GFP和BQA2-GFP两者相比较而言,BQA2-GFP对番茄生长的促进效果更好。5.将标记菌株单独或与青枯菌混合处理番茄苗,研究它们对番茄苗抗性相关防御酶活性的诱导作用。结果发现:标记菌株单独或与青枯菌混合处理后番茄苗叶片的PAL、PPO、POD、SOD、CAT的防御酶活性都大大提高,并且混合处理组的酶活要高于标记菌株单独处理组的酶活。这表明X5-GFP和BQA2-GFP能够诱导番茄苗产生抗性,提高番茄苗对病原菌的抗性。
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