扶正减毒颗粒对放射性肺损伤小鼠肺病理和MMP-2、MMP-9影响的实验研究

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目的通过观察扶正减毒颗粒对放射性肺损伤模型小鼠肺组织病理学及MMP-2、MMP-9等指标的干预影响,探讨扶正减毒颗粒治疗放射性肺损伤的作用机制,为该药临床推广使用提供进一步理论和实验依据。方法本实验选取60只雌性昆明小鼠,随机分为3组:(A组)空白对照组20只:自实验开始每天经胃灌注生理盐水0.5ml/(只.d);(B组)单纯照射组20只:全肺单次照射12Gy +经胃灌注生理盐水0.5ml/(只.d);(C组)中药干预组20只:全肺单次照射12Gy+经胃灌注扶正减毒颗粒0.5ml/(只.d)。照射当天开始灌胃,至照射后42天结束,于照射后1天,14天,28天,42天分次断颈活杀空白对照组、单纯照射组和中药干预组各5只。各时间点观察各组小鼠全身一般状况及外周血红白细胞计数,称肺脏湿重,观察肺标本大体形态学变化及病理学变化,采用免疫组化法测定小鼠肺脏细胞的MMP-2、MMP-9表达水平。实验数据采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。结果1、动物整体观察:单纯照射组小鼠出现明显精神萎靡、行动迟缓、进食量、活动量减少,体重下降,鼻周红赤、眼睛黄色分泌物、大便干硬,皮毛枯槁脱落、背部出现明显脱毛带,尾巴发黄无光泽。中药治疗组与单纯照射组比较整体状态明显改善。2、外周血细胞计数结果,照射后白细胞比较:空白组与单纯照射组有显著性差异(p<0.01),单纯照射组与中药干预组有统计学意义(p<0.05)红细胞计数结果显示,空白组与单纯照射组有显著性差异(p<0.05),单纯照射组与中药干预组也有统计学意义(p<0.05)。3、肺标本肉眼观察:中药干预组不同时间点肺脏大体观察肿胀、充血、瘀斑均较单纯照射组减轻,肺湿重两组相比有明显差异(p<0.01)。4、肺组织病理学观察:中药干预组照射后各时间点充血,水肿,炎症反应较单纯照射组减轻,肺泡腔内罕见积液,单位面积红细胞渗出两组相比有差别(p<0.05);空白组小鼠肺脏结构清晰,肺泡间隔纤细无增宽。5、免疫组织化学染色测定肺内MMP-2,MMP-9阳性细胞数的表达结果:单纯照射组与空白组比较有显著性差异(P<0.01),中药干预组阳性细胞的表达明显低于单纯照射组(P<0.05)。结论1造模小鼠受照射后肺组织肉眼观察和病理组织切片观察符合急性放射性损伤诊断标准,表明本实验小鼠放射性肺炎造模成功,2小鼠照射后的全身表现符合中医“热毒侵肺”致“气阴两虚”“血络淤阻”的证候传变,3扶正减毒颗粒能减轻造模小鼠的放射性肺炎症状,明显改善小鼠的一般情况及中医证候表现,减轻造模小鼠外周血中红、白细胞的下降。4扶正减毒颗粒能减轻造模小鼠活体肺组织肿胀、出血及镜下肺间质充血、出血、水肿及肺泡结构破坏程度。5扶正减毒颗粒可明显抑制小鼠肺组织细胞中MMP-2、MMP-9的表达水平,这可能是中药减轻肺组织结构重塑,从而抑制放射性肺损伤发生发展的机制之一。
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