【摘 要】
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目的:探讨15-差向异构体-脂氧素A4(15 - epimer - lipoxin A4,15-epi-LXA4)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠小胶质细胞株BV-2细胞活性氧簇(Reactive oxygen spe
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目的:探讨15-差向异构体-脂氧素A4(15 - epimer - lipoxin A4,15-epi-LXA4)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠小胶质细胞株BV-2细胞活性氧簇(Reactive oxygen species, ROS)产生的影响及其机制。方法:以100ng/ml LPS刺激体外培养的BV-2细胞成为炎症模型,15-epi-LXA4预处理BV-2细胞30min后再用LPS刺激BV-2细胞,酶标仪检测BV-2细胞ROS的荧光值;提取细胞浆和细胞膜的蛋白,免疫印迹法检测细胞浆和细胞膜上p47phox蛋白的表达量,以及共聚焦免疫荧光法直接观察BV-2细胞内p47phox蛋白膜移位的情况。结果:100ng/ml LPS可以刺激BV-2细胞ROS的产生,激活NADPH氧化酶的活性,使p47phox由细胞浆转移到细胞膜。而15-epi-LXA4可以降低LPS诱导的ROS的生成;与LPS处理组相比较,p47phox的细胞膜上的蛋白表达量减少,胞浆内的p47phox蛋白表达量增多。共聚焦免疫荧光可直接观察到LPS处理后p47phox在细胞膜上的荧光值较对照组高,而15-epi-LXA4预处理组细胞膜上的p47phox相比LPS处理组荧光值减低。结论:15-epi-LXA4可以抑制LPS诱导的BV-2细胞内ROS的生成,抑制NADPH氧化酶亚基p47phox的膜移位,抑制其激活,从而对小胶质细胞发挥抗炎症和促炎症消退的保护作用。
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