氧化损伤性白内障形成过程中基质金属蛋白酶—2和9的表达及意义

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目的检测氧化损伤性白内障形成过程中随着氧化损伤作用时间的延长晶状体囊膜和晶状体纤维中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和9活性和基因表达的动态变化,探讨MMP-2和9在氧化损伤性白内障形成过程中的作用及意义。方法利用过氧化氢诱导离体新西兰兔晶状体出现氧化损伤性白内障。无菌条件下利用显微镜从后路取出晶状体,将晶状体随机分为两组,对照组置于DMEM培养基中,H2O2组置于含有1mmol/L H2O2的DMEM培养基中,37℃二氧化碳培养箱中孵育,取6、12、24、48小时四个时间点停止孵育。取出晶状体,在显微镜下分离出晶状体囊膜(包括其下的晶状体上皮细胞)和晶状体纤维后,分别利用酶谱法分析其中MMP-2和-9活性变化,利用逆转录聚合酶链反应法(RT—PCR)测定MMP-2和MMP-9的基因表达的变化。结果H2O2组晶状体在培养12小时后即出现混浊,24小时后出现了较明显的混浊,培养48小时后混浊更加明显,而对照组晶状体仍然保持透明。酶谱法表明对照组晶状体囊膜中和晶状体纤维中均未见MMP-2和9的存在;H2O2组晶状体囊膜中存在MMP-2和MMP-9,而晶状体纤维中仅见MMP-9,未见MMP-2的存在。实验组中MMP-2和9的活性随时间的延长均有增强,其中各时间点之间差异有显著性的意义。RT—PCR法发现,对照组晶状体囊膜和晶状体纤维中亦未见MMP-2和MMP-9的表达;H2O2组晶状体囊膜中MMP-2和9均有表达,而晶状体纤维中仅见MMP-9有表达,其中各时间点之间差异有显著性的意义。结论晶状体中MMP-2和MMP-9基因表达的变化和活性的增高可能通过影响晶状体上皮细胞的细胞外基质成分、改变晶状体囊膜组分参与了氧化性白内障的形成。
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